雷莹 陈毅

    心脑血管疾病已成为威胁人类健康的第一杀手。据我国卫计委2013 年大城市居民死亡原因统计,心脏病排在第二位。随着人们生活水平的提高以及生活方式的改变,我国心血管疾病的发生率还会有上升趋势。急性心肌梗死发生时血液供应阻断30 min 以上即可导致心肌细胞不可逆的损伤甚至死亡,及时恢复血供被视为挽救部分心肌细胞功能的重要措施[1,2]。然而,心肌得到血液再灌注后,不仅功能未得到恢复,反而使心肌损伤加重,出现心律失常、梗死面积扩大等病变[3,4]。心梗后损伤局部会形成缺血缺氧微环境,炎症介质渗出浸润,还有再灌注损伤等等,都不利于心肌细胞在损伤区域的存活,如果能提高心肌细胞的存活能力,将可能明显提高介入治疗开通临床心肌梗死血管后细胞存活率,从而达到更加的治疗效果。PTEN 基因最先是作为抑癌基因被发现的,研究证实PTEN 基因能有效抑制肿瘤细胞的生长并具有特异性磷酸酶活性。新近研究还发现PTEN 基因还有促进细胞凋亡作用,其作用机制是通过抑制蛋白激酶B(Akt)途径而使Bcl-2 蛋白表达增加。因此本研究设计通过RNA 干扰抑制体外培养的大鼠心肌细胞的PTEN 基因,从而促进心肌细胞的生长能力和抗凋亡能力,提升心肌细胞对心肌梗死区域缺血缺氧微环境的耐受能力,对抗炎症介质渗出和再灌注损伤,从而为临床心肌梗死区域的心肌细胞存活提供新的治疗思路。

    1 材料与方法

    1.1 材料 SD 大鼠[许可证号:scxk(沪)2016-0001],兔抗鼠ɑ-Sarcomeric Actin一抗,PTEN引物(TAKARA),PTEN 基因的特异siRNA(Qiagen 公司设计合成),改良蒂罗德溶液[各种成分含量：氯化钠(NaCl)：136.9 mmol/L,氯化钾(KCl)：2.68 mmol/L,十二水合磷酸氢二钠(Na2HPO4·12 H2O)：8.1 mmol/L,磷酸二氢钾(KH2PO4)：1.47 mmol/L,氯化钙(CaCl2)：0.9 mmol/L,六水氯化镁(MgCl2·6 H2O)：0.49 mmol/L] ......