叶文正 王珊珊 李词娟 吴一文 刘汉忠 方木平

    黑素瘤是一种恶性黑素细胞肿瘤,恶性程度高,容易出现远处转移,预后极差。在黑色素细胞演变为黑色素瘤细胞的过程中,伴随多个癌基因活化以及抑癌基因的失活,BRAF 基因为其中之一。BRAF 基因是一种癌基因,位于染色体7q34,编码一个67000-99000的丝/苏氨酸蛋白激酶。BRAF 基因在黑素细胞特异的丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)途径中起着关键作用,它参与黑素刺激素活化细胞表面黑素皮质激素-1 受体,进而参与黑素细胞的增殖、分化过程。它将细胞表面的受体和RAS 蛋白通过MEK 和细胞外信号调节激酶(ERK)与核内的转录因子相连接,调节细胞的生长、发育。BRAF 突变后激活MEK-ERK 信号通路导致细胞出现恶性增殖。欧美研究中,白种人BRAF 基因突变为40%～60%[1],中国人群黑色素瘤中,BRAF 基因突变率和欧美国家可能有所差别,本课题组拟通过研究中国汉族人皮肤肢端恶性黑素瘤和非肢端恶性黑素瘤BRAF 基因突变和临床表型及病理特征的关系,为中国汉族人皮肤恶性黑素瘤个体化精准靶点治疗提供理论依据。现报告如下。

    1 资料与方法

    1.1 一般资料 收集2016～2019 年在孝感市中心医院皮肤科连续确诊的79 例中国汉族人恶性黑素瘤患者的石蜡包埋组织,患者中男46 例,女33 例；平均年龄(58.48±13.15)岁。同时选取同期在本院行手术切除的80 例中国汉族人色素痣患者的石蜡包埋组织,患者中男50 例,女30 例；平均年龄(48.01+15.60)岁。整理并收集恶性黑素瘤患者临床资料包括性别、年龄、发病部位、Breslow 厚度、有无溃疡及临床分期等。所有病例均由至少1 位皮肤科和1 位病理科副主任及以上医师进行诊断,疑难病例则由多位皮肤科医师和病理科医师共同讨论后诊断。全部患者均未做化疗、放疗及抗免疫等治疗。该研究通过本院伦理研究委员会批准,批准号(sk2017001)。

    1.2 肿瘤基因组DNA 提取和PCR 扩增目的基因 手动分离石蜡包埋组织中的肿瘤细胞,基因组DNA 提取按照上海生工Ezup 柱式动物基因组DNA 抽提试剂盒说明书进行提取 ......