李洪成

    精子冷冻是生殖辅助技术中的一种,也是精子库的重要工作内容。在精子冷冻复苏后,精子成活率直接关系冷冻精子用于辅助生殖的效果[1]。有研究表 明[2],精子冷冻后的活动力与诸多因素有关,主要包括精子质量、冷冻方法、冷冻保护剂的使用,其中冷冻保护剂使用情况在精子冷冻中发挥重要作用。目前常用的精子冷冻保护剂为蛋黄甘油复合型冷冻保护剂,在使用该过程中冷冻保护剂与精液的配比对精子冷冻保护效果有一定的影响[3]。为了探讨冷冻保护剂与精液配比对精子冷冻复苏后的活动力影响,本文选择1∶1、1∶3 配比冷冻的精子进行观察,分析复苏后前向运动精子百分比及精子活力情况,现报告如下。

    1 材料与方法

    1.1 标本收集 选择2019 年3 月～2020 年6 月辽宁省妇幼保健院人类精子库精子捐献志愿者20 例,取得志愿者知情同意后进行实验,均禁欲7 d 后,手淫法留取精液4 ml 置于无菌取精杯中,在37℃水浴箱中液化处理。根据《世界卫生组织人类精液检查与处理实验室手册(第5 版)》的相关要求[4],对精液进行处理。所有留取精液液化时间均≤1 h,精子浓度≥50× 106/ml,精子活力≥50%。

    1.2 方法

    1.2.1 冷冻保护剂配置 采用蛋黄甘油复合型冷冻剂作为冷冻保护剂,制备过程如下：向37.4 ml 葡萄糖溶液(5%)中加入58.6 ml 的枸橼酸钠溶液(2.9%),在向混合溶液中加入56 ml 甘油,充分混匀后,采用微孔过滤器过滤,孔径选择0.45 μm。过滤后的溶液中加入 48 ml 的新鲜蛋黄,调节pH 值至6.8～7.2 ......