李婕 王小波 李春梅

    当前人口老龄化问题越来越严重,与之相关的疾病负担正日益受到社会的关注,其中年发生率显示不断提升的病症成为备受关注的重点疾病,其中就包括神经退行性疾病。全球疾病负担研究显示,目前约有超过10 亿人受到神经退行性疾病的影响,每年约有近700 万人死于该类疾病。同时,在世界卫生组织的相关预测中得知,预计到2040 年,该疾病的致死率将超过癌症[1]。虽然神经退行性疾病尤其是阿尔兹海默症(AD)和帕金森氏病(PD)等是不同性质的疾病,其明确的发病机制目前也尚不清楚,但研究表明,氧化应激(Oxidative Stress)被认为是AD 和PD 等神经退行性疾病发病的重要原因[2]。超氧阴离子、羟自由基及H2O2等ROS 积累和氧化损伤与神经退行性疾病的发病进程密切相关[2]。

    沉默信息调节因子2 相关酶1(silent mating type information regulation 2 homolog 1,SIRT1) 属于一种基于烟酰胺腺嘌呤二核苷酸而形成的组蛋白脱乙酰化酶,可使P53、Ku70、FoxOs、过氧化物酶体增殖物激活受体γ 辅激活因子(PGC-1α)和核转录因子-κB(NF-κB)等多种蛋白脱乙酰化,在氧化应激和细胞凋亡发生时有一定的作用呈现。在氧化应激过程中,将导致细胞中P300/CBP 对FoxO 家族的乙酰化修饰作用提升,乙酰化的FoxO 家族可促进下游靶分子P53、P16 及P21 的转录和表达,诱导细胞凋亡和衰老。而SIRT1 可使FoxO 家族去乙酰化,促进DNA 损伤修复和抑制细胞衰老和凋亡等多种生物过程,预防各种疾病的发生[3,4]。

    丙泊酚作为临床麻醉中常用的镇静药物,因具有起效迅速、短效、复苏迅速、可控性好、副作用少、首相迅速分布及消除等优点被广泛应用于外科麻醉[5,6]。本研究采用H2O2对HT22 细胞实施处理,以完成体外神经细胞损伤模型的创建,期间通过丙泊酚执行干预操作,最终观察丙泊酚是否可抑制H2O2损伤的神经元细胞凋亡,以及是否通过SIRT1-FoxO1 信号通路起到保护作用,为临床治疗、临床用药及改善患者预后提供一定的理论和实验依据。现报告如下。

    1 材料与方法

    1.1 试剂 丙泊酚(北京费森尤斯卡比医药有限公司)；海马神经元HT22 细胞株(北京北纳创联生物技术研究所)；胎牛血清、1640 培养基、0.25%胰蛋白酶均购自美国Gibco 公司；NAD/NADH 检测试剂盒(碧云天生物技术公司)；SIRT1 抗体、Cleaved-Caspase3、Bax、Bcl-2、Cyt C、β-actin 抗体均购自Cell Signaling Technology 公司 ......