陈子合 黄健 黄春鑫 刘慧临

    乳腺癌(breast cancer)是女性发病率最高的恶性肿瘤,全球乳腺癌新发病例约230 万,在全部新发恶性肿瘤中占比11.7%,乳腺癌发病率已经超过肺癌,成为最常见的癌症[1]。目前国内常用的治疗方式是联合治疗[2],但预后仍然不尽人意,部分患者死于肿瘤复发或远处转移。雷公藤内酯醇(triptolide,TPL)是一种天然成分,来源于中药雷公藤的根[3],其具有多种作用,包括抗炎、抗氧化、抗癌等。对于癌症治疗,雷公藤内酯醇已经被证实可以显著抑制乳腺癌的生长,治疗乳腺癌效果良好[4]。由于雷公藤内酯醇在水中溶解性低以及对人体胃肠道、造血系统等毒性较大[5],使其在临床应用上受到了较大的限制。而超声分子影像技术的出现,则为临床提供了更高效诊断、治疗的新技术和方向。超声微泡能够协载输送药物,克服了药物的低水溶性,并且还能够减少药物对于正常组织器官的毒副作用[6]。既往研究发现,乳腺癌MCF-7 细胞表面有大量的叶酸受体表达[7],而叶酸能够特异性地与叶酸受体结合,因此利用超声微泡协载成像物质与其连接,可以在分子和细胞水平上靶向监测乳腺癌的分布范围和位置,通过超声靶向击碎技术,能够定点释放协载药物,做到精准治疗。因此本研究旨在制备一款协载雷公藤内酯醇靶向于人乳腺癌MCF-7 细胞的超声微泡(FA-TLLM),评价其表征并对乳腺癌细胞增殖抑制作用进行初步研究。

    1 材料与方法

    1.1实验材料与主要仪器

    1.1.1实验材料 1,2-二棕榈酰-sn-甘油-3-磷酰胆碱(DPPC,上海麦克林生化科技有限公司)、二硬脂酰磷脂酰乙酰胺-聚乙二醇2000-叶酸(DSPEPEG2000-Folate,重庆渝偲医药科技有限公司)、雷公藤内酯醇(上海源叶生物科技有限公司)、全氟丙烷(C3F8,天津核工业理化工程研究院)、叶酸单克隆抗体、FITC 标记的兔抗鼠免疫球蛋白G(IgG)(上海艾比玛特生物医药有限公司)、人乳腺癌MCF-7 细胞(中国科学院上海细胞库)、Cell Counting Kit-8(上海陶术生物科技有限公司)

    1.1.2主要仪器 真空旋转蒸发仪(瑞士BUCHI)、银汞调和机(上海医疗器械公司)、倒置荧光显微镜(德国Zeiss)、流式细胞仪(美国BD)、激光粒径测定仪(美国PSS)、酶标仪(澳大利亚Tecan)、便携式超声诊断仪(荷兰Philips) ......