凌颖聪 孙淑湘 徐进美 莫忠游 陆叶 李秋丽

    大量研究表明,无创产前基因检测对于21 三体综合征、18 三体综合征、13 三体综合征具有较高的敏感性和特异度,是目前准确性最高的非整倍体产前筛查方式。然而NTPT 对于其他常染色体非整倍体、性染色体非整倍体异常、微缺失/微重复的检出率和阳性预测值目前仍存在较大争议。本研究对2017～2020 年31130 例参与NIPT 检测的孕妇结果进行回顾性分析,并对NIPT 筛查结果提示为性染色体异常高风险的152 例孕妇在知情同意下进行羊水染色体检查(应用核型分析结合CNVs 技术,核型分析结合FISH 技术进行确诊),并行追踪随访,探讨NIPT 对于筛查性染色体异常的价值。

    1 资料与方法

    1.1 一般资料 选取2017～2020 年自愿参与NIPT 检测的孕妇31130 例。纳入标准：经临床咨询符合NIPT检测原则孕12～26 周的孕妇。排除标准：①夫妇一方有明确染色体异常；②1年内接受过异体输血移植手术,异体细胞治疗等；③胎儿超声检查提示有结构异常；④有基因遗传病家族史。

    1.2 方法 对NIPT 筛查结果提示为性染色体异常高风险且知情同意的孕妇进行羊水染色体检查(应用核型分析结合CNVs 技术,或核型分析结合FISH 技术进行确诊)。

    1.2.1 NIPT 筛查 采集孕妇外周血10 ml,在72 h 内4℃离心10 min 收集上层血浆1600 g,将收集的16000 g血浆常温离心10 min,再吸取上层血浆,分装,-80℃保存。利用磁珠法对1200 μl 血浆进行DNA 提取,最终洗脱体积为42 U,使用Qubit3.0 测定DNA 质量浓度。取全部的DNA 溶液进行建库(PCR-Free),包括末端修复,加接头,再对文库进行Real-timePCR 定量,最后通过NextseqCN500 进行测序,对测序数据进行生物信息学分析,计算Z 值,评估胎儿患病风险。

    1.2.2 羊水G 显带核型分析 B 超引导下行羊膜腔穿刺,取羊水20 ml,置于2 支无菌离心管中,离心后取沉淀的羊水细胞分别无菌接种于5 ml 的羊水培养基,置于37℃二氧化碳培养箱培养7～9 d ......