巨噬细胞集落刺激因子对1，25二羟基胆钙化醇诱导破骨样细胞噬骨能力影响的观察(1)
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摘要：目的 检测M-CSF(macrophage colony-stimulating factor)巨噬细胞集落刺激因子对1，25二羟基胆钙化醇(1，25(OH)2D3)诱导形成的破骨样细胞噬骨能力的影响。 方法 加入M-CSF及1，25二羟基胆钙化醇(1，25(OH)2D3)诱导该大鼠骨髓单核细胞生成破骨样细胞，对照组只加1，25二羟基胆钙化醇诱导该大鼠骨髓单核细胞生成破骨样细胞。用甲苯胺兰染色鉴定破骨细胞嗜骨能力。 结果 诱导破骨细胞TRAP 染色阳性。甲苯胺兰染色显示破骨样细胞在骨片上培养时产生一定面积及深度的骨陷凹。 结论M-CSF组形成的破骨样细胞在特异酶及噬骨能力与对照组无差异。
关键词：破骨细胞；培养；诱导；鉴定
中图分类号：R816.8 文献标识码：A 文章编号：1005-0515(2013)8-023-02
材料和方法
1 动物及药品
新生24 h Wistar大鼠(沈阳医学院动物部)， 1， 25 ( OH ) 2 D3 、胰蛋白酶、 萘酚AS-BI磷酸钠、酒石酸甲钠(Sigma)， DMEM培养基(Gibco)，胎牛血清(天津灏洋) ，EDTA，M-CSF(Sigma) 。
2 方法
2.1 薄骨磨片的制备及处理：
取新鲜成年牛股骨皮质-20℃贮存。使用前用钢锯锯成1 cm宽条后用磨片机磨成厚50μm的 1 cm×1 cm骨片 ，蒸馏水中清洗 10次 ，置于75%酒精中，侵泡24 h，自然晾干 ，在超净台内骨片两面紫外线照射消毒后放于DMEM 液中4℃备用 ......
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