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编号:13574341
活的但非可培养(VBNC)状态细菌的研究进展(2)
http://www.100md.com 2018年9月1日 《检验医学》 20189
     三、核酸染色法由于核酸在应用吖啶橙染色时,RNA含量较多的活细胞显示橙黄色荧光,而处于稳定期,饥饿状态和VBNC 状态的细菌DNA含量超过RNA含量,呈现绿色荧光。因此有人使用吖啶橙染色法(AODC) 或者DAPI(4,6- 二脒基-二苯基吲哚)来确定细胞状态。Cappelier等[18]用双染法(CTC-DAPI)检测和计数空肠弯曲菌活而不可培养细胞。并提出当联合用标准的培养方法时,双染法比活菌直接计数法能更容易监测到空肠弯曲菌的VBNC状态。

    四、呼吸检测在细菌培养物中加入无色的等电子受体如CTC 或者INT,活细胞的新陈代谢作用可以将其无色状态还原成紫色或者红色,进而通过颜色来判断细菌的死活状态。Rodriguez等[19]应用荧光氧化还原探针CTC来直接观察活的可呼吸的细菌。鲁巍等[20]对饮用水中几种细菌计数方法进行了比较,得出CTC方法能够比较准确的反映活细菌的数量,而且该方法的试验费用相对较低,适合实验室研究使用。

    五、流式细胞术 Sachidana等[21]用流式细胞术监测细菌细胞的活的但非可培养状态;Pianetti等[22]用流式细胞学和传统的方法测定不同类型水中嗜水气单胞菌的活性,结果显示用流式细胞学可以快速检测到处于VBNC状态的细菌,而传统的方法是无法检测到的;同样的,Mohiuddin等[23]成功的使用流式细胞学快速、特异的计数VBNC和可培养的革兰阴性细菌 ......
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