金纳多对遗传性视网膜色素变性的治疗作用(2)
 |
| 第1页 |
参见附件(1373KB，2页)。
2.3 HE染色显示RCS大鼠EGb761组20、25 d时,视网膜内核层厚度均超过生理盐水组(P<0.01),内核层细胞数目和节细胞层细胞数目多于生理盐水组,且排列较规整,感光细胞数目比对照组细胞数目多(P<0.05)。30 d以后各时间段EGb761组和对照组感光细胞数目相比无明显差异。
2.4 EGb761组大鼠视网膜FasL表达规律与生理盐水组相似,但15、20、25 d组FasL表达较生理盐水组减少(P<0.05)。bcl-2染色显示生后20 d的EGb761组和生理盐水组在节细胞层和内核层可观察到阳性染色。RCS大鼠EGb761组和对照组bcl-2阳性染色无明显差别。TUNEL染色显示RCS大鼠EGb761组20、25 d,外核层也可观察到TUNEL反应阳性的细胞核,阳性细胞数与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。其余时间段RCS大鼠EGb761组和对照组TUNEL反应阳性细胞数无明显差异。
3 讨论
本实验主要得出以下结论:①在RCS大鼠视网膜变性的早期,EGb761对神经元起保护作用,可以使感光细胞得到更多存留;②2、EGb761对视网膜变性神经元的早期保护作用可能是通过抑制凋亡相关调控因子FasL的方式进行的,其保护作用可能与bcl-2无关;③RCS大鼠视网膜变性的早期,视皮质17区细胞与对照SD大鼠相比适应性的出现细胞数目增加,截面积变小;④FasL和bcl-2蛋白均参与了大鼠视皮质17区细胞的早期成数分化。RCS大鼠和对照的正常SD大鼠的视皮质在FasL和bcl-2蛋白表达上的差异表明其视皮质17区细胞也在视网膜色素变性过程中产生了适应性的变化。
在实验中笔者观察到RCS大鼠腹腔注射EGb761组HE染色在20、25 d组感光细胞数目比对照组细胞数目多(P<0.05)。EGb761组内核层可观察到FasL蛋白阳性表达,其中15、20、25 dFasL阳性细胞数比对照组比少,差异有统计学意义(P<0.05)。EGb761组和对照组bcl-2染色无明显差异。TUNEL染色结果为EGb761组20、25 d,外核层也可观察到TUNEL反应阳性的细胞核,阳性细胞计数分别为(10.34±1.13)个/100μm和(17.17±1.72)个/100μm,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。
综合以上结果,笔者认为EGb761在RCS大鼠视网膜色素变性的早期发生中起到了保护感光细胞的作用。具有诱导凋亡能力的FasL的表达方式提示这种保护作用与抑制FasL的表达有关,TUNEL染色结果可证实了不同时间段中EGb761组和对照组间在凋亡细胞数目上的差别。但研究中还发现RCS大鼠生后25 d以后,EGb761对感光细胞变性基本不起作用,此时TUNEL染色给药组和对照组间无显著差异。这可能与以下两个因素有关:①先前已经提到,RCS大鼠生后25 d感光细胞发生凋亡,35 d是感光细胞凋亡的高峰期。随着感光细胞的凋亡,外核层细胞数目减少,对氧的需求量就减少,RCS大鼠很有可能随着外核层细胞数目的减少而摆脱低氧状态;②由于RCS大鼠的基本缺陷在于基因突变,虽然EGb761可以暂时延缓感光细胞的变性,但感光细胞变性的整体趋势是不可改变的。同时提示EGb761对感光细胞的保护作用可能与bcl-2没有关系。
综上所述,视网膜色素变性是一种发病年龄早,病程进展慢,对视力影响大的遗传性致盲眼病。多种突变基因干扰了感光细胞内光电转化反应和能量代谢,并通过不同途径,激活视网膜色素上皮细胞及感光细胞内程序化死亡过程。但迄今为止,视网膜色素变性一直没有有效的药物治疗。近几年研究表明,EGb761一个新的有发展前景的神经保护剂,并且EGb761的神经保护作用部分是通过对凋亡的抑制实现的。本试验在RCS大鼠不同鼠龄段注射EGb761,通过TUNEL及凋亡相关因子检测,结果显示EGb761能抑制感光细胞早期神经元的凋亡。基于EGb761对神经元具有保护作用,临床应用具有安全可靠、耐受良好等优势。因此,可以把EGb761作为一种理想的治疗药物。
参考文献
[1] Bourne MC,Campbell DA,Tansley K. Hereditary degeneration of rat retina.Ophthalmol,1938,22: 613-623.
[2] Bok D. Retinal photoreceptor-pigment epithelium interactions. Invest Ophthlmol Vis Sci,1985,26:1659-1694.
[3] Tso MO,Zhang C,Abler AS,et al. Apoptosis leads to photoreceptor degeneration in inherited retinal dystrophy of RCS rats. Invest Ophthalmol Vis Sci,1994,35 (6): 2693-2699.
[4] LaVail MM,Battelle BA,et al.Influence of eye pigmentation and light deprivation on inherited retinal dystrophy in the rat.Exp Eye Res,1975,21: 167-192.
[5] Yu DY,Cringle SJ,Su EN,et al. Intraretinal oxygen levels before and after photoreceptor loss in the RCS rat.Invest Ophthalmol Vis Sci,2000,41:3999-4006.
[6] Lavail M.M.,Unoki K,and Yasumura D.Y,et al. Multiple growth factors,cytokines,and neurotrophins rescue phtoreceptors from the damaging effects of constant light.Proc Natl Acad Sci USA,1992,89: 11249 ......
您现在查看是摘要介绍页，详见PDF附件(1373KB，2页)。