灵芝孢子粉对2型糖尿病大鼠睾丸细胞凋亡及核转录因子NF-κB/P65表达的影响
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【摘要】 目的 观察灵芝孢子粉对2型糖尿病大鼠睾丸细胞凋亡及核转录因子NF-κB/P65表达的影响。方法 Wistar雄性大鼠50 只,随机分成3组(对照组、模型组、灵芝组)。TUNEL法检测睾丸细胞凋亡率,免疫组化法检测核因子-κB转录(NF-κB/P65)蛋白的表达。结果 模型组细胞凋亡率和NF-κB/P65的表达均明显高于对照组和灵芝组(P<0.05)。结论 灵芝孢子粉对糖尿病大鼠睾丸组织具有保护作用,可抑制睾丸细胞凋亡,可能与其减轻氧化应激、减少糖尿病睾丸过度表达NF-κB/P65有关。
【关键词】 2型糖尿病;核转录因子(NF-κB/P65);细胞凋亡;灵芝孢子粉
Ganoderma lucidum powder on type 2 diabetes rat testis cell apoptosis and nuclear transcription factor NF-κB/P65 expressioninfluence
ZHONG Li-li,ZHANG Wei-jia.
Department of Pathology, First Hospital of the University of Chinese Medicine in Helongjiang,Harbin 150040,China
【Abstract】 Objective The observation ganoderma lucidum spore powder perishes weakly to type 2 diabetes big mouse testis cell and the nucleus transcription factor NF-κ B/P65 expression influence.Methods Divides into 3 groups stochastically 50 Wistar big mouse:Control group,diabetes group,ganoderma lucidum group.TUNEL method examines testis cell apoptosis rate,the immunity group reduction examines the nuclear factor-κB duplication(NF-κ B/P65)the protein expression.Results Cell apoptosis rate and NF-κ B/P65 expresses the diabetes group to be higher than the control group and the ganoderma lucidum group obviously(P<0.05).Conclusion The ganoderma lucidum spore powder has the protective function to diabetes big mouse testis organization,may suppress the testis cell to perish weakly,possible to reduce the oxidized stress,the reduced diabetes testis with it to express NF-κ B/P65 to concern excessively.
【Key words】 Type 2 diabetes; Nuclear transcription factor(NF-κ B/P65); Cell apoptosis; Ganoderma lucidum spore powder
糖尿病伴性功能与生殖功能障碍无论在人还是在实验动物都有报道,发病率高达35%~75%[1],严重影响了患者的生活质量,甚至不育,其发病机制仍未完全阐明,近年来已注意到细胞凋亡在糖尿病慢性并发症发生发展中的作用。由此推测,睾丸细胞凋亡可能参与糖尿病生殖功能障碍的生理及病理过程。本实验研究灵芝孢子粉对2型糖尿病大鼠睾丸细胞凋亡和核转录因子(NF-κB/P65)表达的影响,进一步探讨灵芝孢子粉对2型糖尿病大鼠睾丸功能的影响和作用机制。
1 材料与方法
1.1 药品与试剂 链脲佐菌素(STZ)为北京拜尔迪生物技术有限公司产品;葡萄糖液体试剂盒(潍坊3V生物工程有限公司);灵芝孢子粉为佳木斯灵芝养殖厂产品。
1.2 方法
1.2.1 2型糖尿病大鼠模型的建立及分组 雄性Wistar大鼠50只,随机分为对照组、糖尿病组和灵芝组。模型组及灵芝组大鼠经尾静脉一次性按25 mg/kg注射2%链脲佐菌素(STZ),正常对照组尾静脉注射等量柠檬酸钠-柠檬酸缓冲液。正常饮食喂养2周后,进行糖耐量试验,模型组和灵芝孢子粉组以糖耐量异常者保留,余去除。模型组改喂高脂高糖饮食,灵芝组另加灵芝孢子粉250 mg/(kg•d)持续10周。实验结束前一天做糖耐量试验[2]。
1.2.2 葡萄糖耐量试验 大鼠禁食6 h后,腹腔注射1.11 mol/L葡萄糖溶液2 g/kg,内眦取血测定0、0.5、1、2 h血清葡萄糖水平。
1.2.3 NF-κB蛋白表达测定 采用免疫组织化学SP法检测。
1.2.4 凋亡率测定 采用TUNEL方法检测。
1.2.5 统计学处理 所有数据以均数士标准差(x±s)表示,阳性率的比较采用SPSS l1.5软件进行检验。以P<0.05为差异有统计学意义 ......
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