刘璐 匡荣 虞佳涛 李墨池 张劲松

    糖尿病是全球性的慢性疾病,患者由于缺乏胰岛素分泌减少或者产生耐受,导致血糖代谢紊乱,形成高血糖症。目前,治疗糖尿病主要方式是口服降糖药和注射胰岛素,而对于胰岛素起效作用而言,分为长效、中效、短效和速效胰岛素,市场上主要的胰岛素产品有德谷胰岛素、门冬胰岛素,门冬胰岛素是用生物技术将人胰岛素氨基酸链B28 位的脯氨酸由天门冬氨酸替代而成的,具有降血糖作用,注射后15 min 起效,作用可持续 3～5 h。门冬胰岛素的降血糖作用是通过其分子与肌肉和脂肪细胞上的胰岛素受体结合后,促进细胞对葡萄糖吸收利用,同时抑制肝脏葡萄糖的输出来实现的。临床数据表明,通过安全性药理学、重复给药毒性、遗传毒性和生殖毒性的常规试验发现,门冬胰岛素对人体没有特殊危险。在体外试验中,包括与胰岛素和胰岛素样生长因子-1 受体的结合,以及对细胞生长的影响,门冬胰岛素的表现与人胰岛素非常相似[1-6]。因此,门冬胰岛素的有效性研究成为产品质量控制的关键,主要体现在其生物活性/效价的控制,也有通过液相、超高液相方法测定门冬胰岛素的含量方法,两者结合精确度更高,本研究根据中国药典对门冬胰岛素测定方法进行规范的验证,用门冬胰岛素标准品,以小鼠为载体,建立门冬胰岛素生物活性测定方法[7-10],确保测定方法的可行性,为产品优化提供科学依据。

    1 材料与仪器

    1.1 实验动物 120 只雌性ICR 小鼠,无特定病原体(SPF)级,体重20～26 g,购自上海吉辉实验动物饲养有限公司,动物生产许可证：SCXK(沪)2017-0012,动物实验室：浙江省食品药品检验研究院,动物使用许可证：SYXK(浙)2021-0016,所有动物的使用均经过实验动物使用和管理委员会(IACUC)批准,IACUC 编号为2021-010 ......