1.3 组织学分析

    横切片行兔抗FⅧ(武汉博士德公司)的免疫组化染色,采用不含一抗的PBS溶液代替一抗作为阴性对照。阳性对照采用已知阳性的家犬的子宫内膜标本。

    微血管计数:每个标本有两个横切片进行观察计数。标出横切片的中心,将中心与邻接滑膜的韧带边缘之间的连线分为三部分,这样每个横切片被分为滑膜下部(邻接滑膜层)、中间部、核心部三部分。滑膜下部、中间部各计数5个200倍镜视野,核心部计数3个高倍视野。将每区所有高倍镜视野中的计数平均,然后按面积(mm2)标准化取值代表韧带横切片的微血管密度。由三位不知临床资料的高年资病理医师采用背对背方法分别进行,取计数的平均值。

    1.4 统计学处理

    实验数据使用SPSS 11.0处理,分6周和12周利用析因分析对固定与否以及射频处理韧带两端或中间进行检验,同时检验两者是否有交互效应。利用配对t检验及独立样本的t检验对比分组间的血管密度的差别。当P<0.05时有显著性差异。

    2 结果

    2.1 步态观察及韧带观察

    家犬出现跛行、关节异常畸形和后肢上抬无法负重等提示关节内可能存在ACL功能异常。固定侧后肢未出现异常活动,而未固定侧后肢在不同时间内出现异常活动。6周时未发现实验动物无外固定后肢有异常活动。B2组出现关节异常活动的时间为(57±4)d,而A2组出现关节异常活动的时间为(54±5)d,两者对比无显著性差异 ......