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编号:11879638
环介导等温扩增技术在临床检测中的应用(1)
http://www.100md.com 2009年8月25日 《中国现代医生》 2009年第24期
环介导等温扩增技术在临床检测中的应用

     [摘要] 目的 探讨环介导等温扩增技术在临床检测中的应用。方法 采用我院2008年10月门诊或住院患者85份试验用的含结核杆菌的阳性痰液和阴性痰液,通过染色涂片镜检和经典PCR的方法及使用改良罗氏培养法进行培养予以定性,并与LAMP法检测结果比较。结果 LAMP法与培养法、Amplicor MTB PCR法检测痰液中结核分枝杆菌的阳性率无明显差异。结论 LAMP法是一种新型的核酸扩增方法;由于它是近年来兴起的一种技术,是一种便捷、特异性强和灵敏度高的快速基因检测技术。

    [关键词] 环介导等温护增技术;临床检测

    [中图分类号] R446.1 [中图分类号] A[文章编号] 1673-9701(2009)24-43-02

    日本学者Notomi等[1]于2000年发明了一种全新的核酸扩增方法——环介导等温扩增技术(loop-mediated isothemal amplifi cation LAMP),其特点是针对靶基因的6个区域设计4种特异引物,利用一种链置换DNA聚合酶(Bst DNA polymerase)在等温条件(65℃左右)保温几十分钟,即可完成核酸扩增反应[2]。不需要模板的热变性、长时间温度循环、繁琐的电泳、紫外观察等过程,该技术的问世解决了基于核酸的分子生物学检测技术的诸多难题,使其作为快速诊断方法成为可能.,已经被广泛用于细菌、病毒和寄生虫等的检测,动物胚胎性别鉴定,食品卫生检疫及基因芯片的开发等,我们采用LAMP法对痰液中和培养基中的结核分枝杆菌进行检测,并分析报道如下 ......
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