中介素1-53对肺缺血再灌注损伤大鼠肺组织PPAR-γ表达的影响(2)
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1.4.2 免疫组化法测肺组织PPAR-γ采用免疫组织化学染色(SP)法检测大鼠肺组织PPAR-γ蛋白的表达。应用图像分析系统进行分析图像分析,以平均光密度值(IOD)表示。
1.4.3肺组织匀浆CINC-1含量冷冻肺组织称重后,使用PBS(pH=7.4)缓冲液制成10%匀浆,离心,留取上清液,按照ELISA试剂盒说明书测定CINC-1含量。
1.4.4肺组织W/D比值测定取1g右肺中叶组织用分析天平称重为湿质量,置于70℃电热恒温干燥箱中烤48h后称重为干质量,湿质量与干质量之比即为W/D。
1.4.5病理检查取右肺中叶约1cm×1cm×1cm 大小组织块,用10%甲醛固定,予以常规石蜡包埋、切片,苏木素-伊红(HE)染色,光镜下观察肺组织病理学变化。
1.5统计学处理
计数资料以均数±标准差(χ±s)表示,采用SPSS16.0统计软件进行多组资料的方差分析,各时点组间多重比较采用最小显著差法,P<0.05为差异有统计学意义。
2结果
2.1肺组织PPAR-γ的表达
2.1.1肺组织PPAR-γmRNA的表达变化RT-PCR结果显示电泳结果显示在DNA标准222bp处,可见PPAR-γmRNA表达。在IR组缺血再灌注各时相,可见PPAR-γmRNA表达均较对照组明显下降(P<0.05),但在中介素干预后可见PPAR- γmRNA表达水平较IR组明显升高(P<0.05),但仍低于手术对照组,见图1。
2.1.2肺组织PPAR-γ蛋白的表达变化PPAR-γ免疫组织化学反应阳性产物呈棕黄色颗粒,主要分布在细胞核内和核周。结果显示,在手术对照组(C组),肺组织表达高水平PPAR-γ蛋白,主要分布在肺泡上皮细胞、小支气管上皮细胞,巨噬细胞和血管内皮细胞;在缺血再灌注组(IR组)再灌注120min则可见PPAR-γ蛋白表达较对照组下降(P<0 ......
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