HBsAg\HBcAg的免疫荧光检测在HBV-GN诊断中的应用(2)
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HBsAg、HBcAg的免疫荧光检测采用间接法检测,此法是直接法的重要改进,先用特异性抗体与肾组织结合,形成抗原-抗体复合物,再用针对一抗的标记荧光素的二抗与上述抗原-抗体复合物结合,形成抗原-抗体-荧光抗体的复合物,发出荧光,在荧光显微镜下观察。间接法较直接法敏感5～10倍,而且只需要一种标记的荧光抗体[12]。此法的缺点是:容易引起非特异性染色。实验过程中采用NHBV-GN患者(选择肯定无HBsAg、HbcAg沉积的病例)作为对照组,同时应用Polyclonal Rabbit Albumin/FITC作对照排除。以保证结果的正确判读。
本次研究结果显示,HBV-GN患者肾组织中可检测到HBsAg、HBcAg阳性颗粒,阳性率分别70%(35/50),24%(12/50);20例(NHBV-GN)患者肾脏组织HBsAg、HBcAg均未检出。与HBV-GN相比差异有统计学意义(P<0.05)。免疫荧光染色可见到HBsAg、HBcAg不同程度沉积在肾小球系膜区、毛细血管基底膜或内皮下。HBsAg与HBcAg的分子量较大,且带有负电荷,因此它们形成的免疫复合物很难穿透肾小球基膜,主要沉积于内皮下及系膜区引起系膜毛细血管性肾炎或系膜增生性肾炎[13]。HBsAg以系膜区沉积为主[2],HBcAg主要沉积在基底膜区,HBcAg阳性率明显低于HBsAg ......
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