宫颈癌患者联合检测血清suPAR及SCC-Ag的意义(2)
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晨起采集空腹静脉血2～4mL,用3.2%枸橼酸钠1:9抗凝处理,4℃离心半径13cm,3000r/min离心10min,分离血浆置于 -80℃冰箱冻存,待检。手术患者均为术后3个月门诊复查时采血。
1.3 仪器与试剂
human uPAR ELISA试剂盒采购自美国Assaypro 公司、全自动酶标仪、TECANM8/2R 型全自动洗板机、TGL-32G高速离心机。SCC-Ag ELISA试剂盒采购自瑞典Fujirebio Diagnostics AB公司。
1.4 实验方法
用ELISA法检测血清中suPAR水平,在聚苯乙烯微量反应孔板中加入预先配制的标准品,室温下孵育2h。用洗板机洗涤5次后控干,再加入抗uPAR抗体室温下孵育30min,再将微量反应孔板放入洗板机洗涤5次控干,每孔加入50μL抗生物素蛋白链菌素-过氧化物酶复合物室温下孵育30min,打开酶标仪设定好程序。每孔加入50μL显色剂室温下孵育大约10min直到生成最佳蓝色,每孔加入50μL终止液直到颜色由蓝变黄。最后将微量反应孔板放入全自动酶标仪在450nm波长下读取光密度值(OD值),实验过程中的具体步骤和方法严格按照试剂盒说明书操作。用ELISA法检测血清中的SCC–Ag水平的方法和前面基本一样,具体操作步骤同样按照试剂盒说明书严格操作。
1.5 统计学方法
采用SPSS11.5软件包进行数据处理,所有数据均以χ±s表示,组间差异用单因素方差分析,各组均数间两两比较采用SNK-q检验,Spearman秩相关进行相关性分析。
2 结果
2.1 子宫颈癌患者与子宫肌瘤对照组血清中uPAR含量的比较
见表1。
表1提示:宫颈浸润癌患者和宫颈原位癌患者血清suPAR水平均比子宫肌瘤对照组显著升高 ......
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