BRMS1\HDAC1\VEGF-C在乳腺癌组织中的表达及意义(2)
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正常乳腺组织收集后经福尔马林液固定,24h内取材,常规脱水、透明、浸蜡、包埋,切片(厚度为4μm),制作成石蜡切片。免疫组化(SABC法)严格按试剂盒说明操作。设阳性对照和阴性对照,以已知的乳腺癌阳性片为阳性对照,以PBS代替一抗的乳腺癌组织免疫组化染色结果为阴性对照。
阳性判定:染色主要位于细胞胞浆或(和)胞核内,阳性表达标准参照Kurose K[1]和李治[2]的报道,根据阳性细胞数和着色深度(与背景着色相对比)计分。先将阳性细胞染色强度评分(a),无色或基本不着色为0分,淡黄色为1分,棕黄色为2分,棕褐色为3分;再按阳性细胞所占的百分比评分(b),每例随机计数5个高倍镜(×400)视野,确定其每个视野的阳性率,取平均数,阳性细胞比例<10%为0分,10%～50%为1分,50%以上为2分。将两者得分相加,a+b<3分计为阴性,≥3分为阳性。
1.5 统计学处理
实验资料的统计学处理通过SPSS11.5统计软件包进行。率的比较采用χ2检验,多个率的比较采用R×C表χ2检验,两两比较采用χ2分割法,相关性分析采用Spearman等级相关分析。P值<0.05时认为两组之间有差异。P值<0.01有显著差异。
2 实验结果
乳腺癌组60例患者均为女性,年龄31～79岁,中位年龄50.1岁。其中<50岁32例,≥50岁28例;肿瘤直径≤2cm 21例,肿瘤直径>2cm 39例;无淋巴结转移20例,有淋巴结转移 40 例;乳腺癌临床分期根据国际抗癌协会制定的乳腺癌TNM分期标准,Ⅰ期9例,Ⅱ期27例,Ⅲ期21例,Ⅳ期3例;PR阳性44例,PR阴性16例;ER阳性32例,ER阴性28例;Her-2(-)～(+)41例,Her-2(2+)～(3+)19例。
60例乳腺癌组织标本及乳房纤维瘤、正常乳腺组织BRMS1、 HDAC1、VEGF-C蛋白的表达。见表1～2。
3 讨论
3.1 BRMS1在乳腺癌中的表达及临床意义
肿瘤转移是癌症患者死亡的主要原因,在肿瘤转移过程中除存在原癌基因的激活、抑癌基因的失活、细胞间的黏附异常以及金属蛋白酶及其抑制剂表达失控外,染色体发生杂和性缺失(LOH)与恶性肿瘤转移的关系十分密切,乳腺癌转移抑制基因1(breast cancer metastasis suppressor 1,BRMS1)是2000年宾夕法尼亚州立大学Hershey医学中心Welch DR研究组发现的一种转移抑制基因 ......
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