吡咯烷二硫代氨基甲酸酯及吡格列酮保护糖尿病大鼠肾脏机制的实验研究(2)
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[Key words]Diabetic nephropathy; Pyrrolidine dithiocarbamate; Pioglitazone; Nuclear factor-κB; Monocyte chemoattractant protein-1
近年来研究表明,糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)是一种慢性低度炎症性疾病[1],发病机制与众多细胞因子表达紊乱有关。核转录因子-κB(NF-κB)和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)是必要的细胞因子。NF-κB作为一种重要转录因子,是许多损伤应答、炎症反应基因(细胞因子,组织因子)的一个多效调节因子。MCP-1作为特异性趋化因子,可引起单核巨噬细胞在肾组织浸润,与细胞外基质(ECM)沉积、肾小球硬化密切相关。PDTC是NF-κB特异性的阻断剂,可抑制NF-κB的激活。吡格列酮作为过氧化物酶体增殖受体-γ的配体,用于糖尿病(DM)的治疗以改善胰岛素抵抗。近年来发现也有抗炎作用,确切机制尚未完全清楚。本实验应用PDTC和PIO,旨在观察其对糖尿病大鼠肾脏保护作用及可能的机制。
1 材料和方法
1.1 材料
1.1.1 动物 50只SPF级雄性SD大鼠,体重180～200g,福州总院动物中心提供。
1.1.2 试剂 ①链脲佐菌素(STZ,美国 Sigma公司);②PDTC(美国Sigma公司);③吡格列酮(PIO,江苏恒瑞医药股份有限公司产品);④β-actin单克隆抗体,辣根过氧化物酶(HRP)标记山羊抗小鼠IgG,HRP标记山羊抗兔IgG,兔抗大鼠MCP-1多克隆抗体,兔抗人NF-κB p65多克隆抗体,均为美国Santa Cruz公司产品;BCA蛋白检测试剂盒、Ecl发光试剂,美国Pierce公司产品;PVDF膜,美国Millpore公司产品。
1.2 方法
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