实时荧光核酸恒温扩增技术检测尿液中沙眼衣原体的分析
 |
| 第1页 |
参见附件(1717KB，2页)。
[摘要] 目的 评价实时荧光核酸恒温扩增技术(SAT)检测尿液中沙眼衣原体(CT)的特异性和敏感性。方法 对175例疑似患者生殖道拭子行CT-SAT、PCR检测和沙眼衣原体培养，同时对对应的175份尿液标本行CT-SAT检测。结果 SAT对同一患者的拭子标本和尿液标本的检测结果符合率100%。1例淋球菌培养阴性而SAT阳性，2例PCR阳性而SAT阴性。结论 SAT技术检测拭子及尿液中的沙眼衣原体具有很高的灵敏度和特异性，为CT的实验室诊断提供新的检测方法。
[关键词] 沙眼衣原体；SAT； PCR；培养；尿液
[中图分类号] R374.1 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701(2011)22-124-02
Real-time Fluorescence Detection of Nucleic Acid Amplification Constant Urine Analysis of Chlamydia Trachomatis
SUN Yuhua CHEN Feng CAI Ruiyun
Guangji Hospital in Dongguan City of Guangdong Province，Dongguan 523690，China
[Abstract] Objective To evaluate the real-time isothermal nucleic acid amplification fluorescence(SAT) Chlamydia trachomatis in urine(CT) of the specificity and sensitivity. Methods 175 cases of suspected patients of genital swab line CT-SAT，PCR testing and Chlamydia trachomatis culture，while the corresponding urine specimens of 175 CT-SAT test. Results SAT on the same source swab specimens and urine samples consistent results：Case of SAT-positive and N.gonorrhoeae culture-negative，2 SAT-negative and PCR positive. Conclusion SAT swabs and urine detection of Chlamydia trachomatis with high sensitivity and specificity of laboratory diagnosis for the CT to provide a new detection method.
[Key words] Chlamydia trachomatis； SAT； PCR； Culture；Urine
实时荧光核酸恒温扩增检测技术(simultaneous amplification and testing，SAT)是将新一代的核酸恒温扩增技术和实时荧光检测技术相结合的一种新型核酸检测技术，该技术具有高灵敏度、高特异性、低污染、反应稳定等优点。
1 材料与方法
1.1 主要仪器及试剂
CT-SAT试剂盒由上海仁度生物科技有限公司提供，PCR试剂盒由深圳匹基生物工程有限公司提供，沙眼衣原体培养使用Mc Coy培养皿，实时荧光核酸扩增仪为杭州博日科技有限公司生产。
1.2 标本来源
2009年9月～2010年7月来本院就诊的疑似患者175例，其中男62例，女113例，每份患者取3份分泌物拭子标本和1份尿液标本。
1.3 标本采集
准备3个无菌拭子，分别以A、B、C标示。B号拭子的管内加入1mL无菌生理盐水，C号拭子的管内加入1.5mL无菌生理盐水。患者采样前2h不排尿，取材方法按常规操作[1]。即男性患者由尿道口内3cm处、女性患者由宫颈口内1～1.5cm处取材。棉拭插至取材处后，转动并停留数秒种后取出。A拭子用于淋球菌培养，1h内尽快接种。B拭子取后-20℃冰箱保存，作PCR测定待用。C拭子取后取1mL混合液至专用尿液保存液(试剂盒提供)中，混匀，-20℃冰箱保存，作CT- SAT测定待用。另取1mL首段尿液至专用尿液保存液(试剂盒提供)中混匀，-20℃冰箱保存，用于CT-SAT测定待用。
1.4 检测方法
尿液标本和拭子标本从冰箱取出，平衡至室温同时行CT-SAT检测，按照试剂盒说明书进行操作。
1.5 沙眼衣原体培养
见参考文献[1]。
1.6 统计学分析
应用SPSS10.0软件对数据进行χ2检验。
2 结果
2.1 SAT、PCR及沙眼衣原体培养的检测
SAT检测的阳性63例尿液标本其对应的63例拭子标本SAT检测也是阳性，符合率100%，1例沙眼衣原体培养阴性而SAT阳性，2例PCR阳性而SAT阴性。尿液标本不适用于PCR和沙眼衣原体培养，故均以拭子结果为参照[4]。见表1。
2.2 CT-SAT检测的敏感性及特异性
与沙眼衣原体培养结果作比较，CT-SAT尿液/拭子标本的检测灵敏度为98.41%(62/63)，特异性为99.11%(112/113)，经χ2检验，差异无显著性(χ2=0.01，P>0.05)；与PCR结果作对比，CT-SAT尿液/拭子标本的检测灵敏度为100%(63/63)，特异性为98.21%(110/112)，经χ2检验，差异无显著性(χ2=0.05，P>0.05)。见表1。
2.3 CT-SAT法对拭子标本和尿液标本检测结果的符合率分析
CT-SAT法对175例患者的拭子标本和尿液标本进行检测，两组标本检测结果的符合率为100%，差异无显著性(P>0.05)。
3 讨论
目前CT检测都是以患者的泌尿生殖道分泌物进行沙眼衣原体抗原检测、沙眼衣原体培养和/或PCR检测。取生殖道分泌物容易增加患者的取样痛苦，同时几种检测方法在敏感性和特异性上都有不足。沙眼衣原体抗原检测多用胶体金试剂，阳性率都较低容易造成女性患者尿道感染的漏检。沙眼衣原体培养的敏感性和特异性都较好，但是耗时长。PCR检测的是DNA，患者治疗后病灶处残留的DNA包括杀死后还没排出的菌体DNA都会导致PCR阳性结果 ......
您现在查看是摘要介绍页，详见PDF附件(1717KB，2页)。