血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂洛沙坦对脓毒症大鼠多脏器的保护作用(2)
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参见附件。
1.4 肺功能检测指标
各组再随机抽取5只大鼠，制模后5.5h按30mg/kg经大鼠尾静脉注射2%伊文思蓝液(EBD，北京恒业中远化工有限公司)。①伊文思蓝含量测定法[5]：制模后6h将动物麻醉开胸取部分左肺，剪去周围组织，吸干表面水分及血液，称量湿质量，将肺组织剪成约10mm3小块浸泡于甲酰胺溶液中(0.2g/kg) ，置60℃恒温水浴中抽提24h，待组织中色素全部浸出，取出组织，离心，取上清液，在与标准曲线相同的条件下，用紫外分光光度计(岛津2000)在620nm波长处进行比色测定光密度值，在标准曲线上查出EB含量，以每克肺组织干重含EB质量表示。②湿/干质量比测定：称肺组织湿质量后置烤箱80℃，72h，称干质量，计算湿/干质量比值。为避免EBD影响肺病理切片，将检测心功能用的各大鼠处死后取左肺组织，常规石蜡切片，在光镜下观察并照相。
1.5 肾功能、肝功能及小肠功能检测指标
各组再抽取5只大鼠，于制模后6h将动物麻醉后活杀，腹主动脉无菌采血，采用美国贝克曼Beckman 公司生产的CX5全自动生化分析仪， 定量检测血Bun、Cr、Na+及尿Cr、Na+并计算滤过钠排泄分数FENa[(尿Na+(mol/L)/血清Na+(mol/L)]/[(尿Cr(mmol/L)/血清Cr(mmol/L)]×100%[6]，反映肾功能，同时检测血ALT、AST、TBIL反映肝功能。各大鼠留取0.5mL血液，并距回盲瓣5cm取回肠组织5cm，采用黎君友等报道的方法测定二胺氧化酶(DAO)含量，并以微量考马斯亮蓝法测定小肠组织蛋白含量，使小肠组织DAO活性以每克蛋白中的量来表示[7]。同时各取肾、肝及末段回肠组织常规石蜡切片，在光镜下观察并照相。
1.6 大鼠5d死亡率的计算
各组剩下15只大鼠，分别记录各实验动物手术后的自然死亡时间，观察期共5d，计算5d累计死亡率。
1.7 统计学处理
采用SPSS10.0软件进行处理，计量资料均数(χ±s)表示，组间比较用方差分析，组间两两比较采用q检验，计数资料进行 χ2 检验。P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 心功能指标
CLP组MAP、LVSP、+dP/dtmax、-dP/-dtmax指标及cTnT、CK-MB指标与SHAM组比较均有显著差异(P<0.05)；Pre-CLP组及Post-CLP的MAP、LVSP指标较SHAM组比较显著下降(P<0.05)，较CLP组显著升高(P<0.05)；两组cTnT、CK-MB指标较SHAM组显著升高(P<0.05)，较CLP组显著下降(P<0.05)；两组的+dP/dtmax、-dP/-dtmax指标与SHAM组比较无显著性差异(P>0.05)，较CLP组显著升高(P<0.05)。两处理组之间各项指标差异无统计学意义(P>0.05)。 见表1。
2.2 肺功能指标
CLP组的肺湿/干比重及肺微血管通透性较SHAM组有显著差异(P<0.05)；Pre-CLP组及Post-CLP组的肺微血管通透性分别为(0.028±0.006)mg/g、(0.027±0.007)mg/g，与SHAM组比较显著下降(P<0.05)，与CLP组比较显著升高(P<0.05)，两组之间无显著差异(P>0.05)。Pre-CLP组及Post-CLP组肺湿/干比重与SHAM组比较无显著性差异(P>0.05)，与CLP组比较显著减少(P<0.05)。两处理组之间差异无统计学意义(P>0.05)。 见表2。
2.3 肾功能指标
SHAM组、CLP组、Pre-CLP组及Post-CLP组大鼠血Cr浓度、血Na+浓度及尿Cr浓度比较无显著差异(P>0.05)。CLP组血Bun浓度、尿Na+及滤过钠排泄分数FENa较SHAM组有显著差异(P<0.05)。Pre-CLP组及Post-CLP组的血BUN浓度较CLP组均显著下降(P<0.05)，与SHAM组无显著差异(P>0.05)。Pre-CLP组及Post-CLP组尿Na+浓度及滤过钠排泄分数FENa较CLP组显著升高(P<0.05)，较SHAM组显著下降(P<0.05)。两处理组之间各项指标差异无统计学意义(P>0.05)。 见表3。
2.4 肝功能指标
CLP组ALT、AST及TBIL指标分别为(128.20±20.75)IU/L、(210.60±38.22)IU/L、(6.34±1.54)μmol/L，较SHAM组均显著升高(P<0.05)，模型成功。Pre-CLP组及Post-CLP组的三项指标较SHAM组无显著差异，但较CLP组有显著下降(P<0.05)。两处理组之间三项指标差异无显著意义(P>0.05)。 见表4。
2.5 小肠功能指标
CLP组血DAO活性为(1.79±0.37)KU/L，较SHAM组显著升高(P<0.05)，CLP组小肠组织DAO活性为(2.30±0.48)U/g，较SHAM组显著下降(P<0.05)。Pre-CLP组及Post-CLP组的血DAO及活性小肠组织DAO与SHAM组无显著差异(P>0.05)，但较CLP组有显著差异(P<0.05)。两处理组之间差异无显著性(P>0.05)。 见表5。
2.6 死亡率
两处理组Pre-CLP组和Post-CLP组的死亡率分别46.7%及40.0%，较CLP组均有明显下降(P<0.05)，两组之间无显著差异(P>0.05)。见表6。
2.7 各组心、肝、肾、肺、小肠组织的病理变化(图1)
①光镜下SHAM组心肌细胞结构正常，心肌纤维束排列整齐，横纹清晰，心肌间质无水肿；CLP组大鼠心肌纤维部分断裂、溶解 ......
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