新城疫病毒(NDV)对卵巢癌细胞株(SKOV-3)的杀伤作用(1)
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[摘要] 目的 研究新城疫病毒(NDV)对卵巢癌细胞株(SKOV-3)的杀伤作用。方法 用不同浓度新城疫病毒(NDV-D90)与卵巢癌细胞株(SKOV-3)共培养；在不同时间(6、12、24、48h)观察SKOV-3细胞形态的改变。结果 NDV病毒作用的SKOV-3细胞表现为细胞膜皱缩、细胞核染色质浓缩、细胞溶解和细胞凋亡；NDV可对SKOV-3胞产生抑制作用，抑制效果与浓度及共同孵育时间有关，差异有统计学意义(P<0.01)。结论 NDV对体外培养SKOV-3细胞增殖有明显抑制作用，并可诱导该细胞凋亡。
[关键词] 卵巢癌；NDV；细胞培养
[中图分类号] R735.2 [文献标识码] A [文章编号] 1673-9701(2011)23-25-02
The Effect of Newcastle Disease Virus-infected(NDV) on the SKOV-3
SU Lirong
Obstetrics and Gynecology Department，Beijing Municipal Shunyi District Women and Children Health Care Hospital ， Beijing 101300，China
[Abstract] Objective To investigate the effect of newcastle disease virus-infected(NDV) on the SKOV-3. Methods NDV-D90 in different concentration was cultured with SKOV-3； The SKOV-3 cells were monitored for cell morphological changes under micro scope within 6hours， 12hours，24hours and 48hours respectively. Results The SKOV3 cells infected by NDV become shrinked，dissolved. Cell concentration and apoptotic bodies were observed as well. NDV could effectively inhibit SKOV-3 cell growth， which depends on virus concentration and inoculation time of NDV and the difference of cell growth inhibitory rate among cells was significant(P<0.01). Conclusion NDV can inhibit proliferation and induces cell apoptosis in SKOV-3 cells in vitro.
[Key words] Ovarian cancer； NDV；Cell culture
卵巢恶性肿瘤是女性生殖系统三大恶性肿瘤之一，且手术和放化疗疗效不佳，5年生存率较低，成为严重威胁妇科肿瘤患者生命的疾病。卵巢癌传统的治疗常难以治愈，且易复发。因此寻找特异性强、敏感性高的卵巢癌相关抗原，并探索有效的综合治疗方法有重要的临床意义。肿瘤基因治疗给肿瘤治疗技术带来了新生机，供选择的基因有[1]：细胞因子基因、主要组织相容性复合体基因、病毒基因和反义基因。新城疫病毒(newcastle disease virus，NDV)是近年来兴起引起重视的一种病毒，作为病毒基因，它对多种恶性肿瘤具有一定治疗作用。 2010年3月~ 2011年1月本研究对此课题进行探讨，现报道如下。
1 材料与方法
1.1 材料与仪器
肿瘤细胞株卵巢癌细胞株SKOV-3购自哈尔滨市肿瘤医院细胞生物所；主要试剂新城疫病毒(NDV-D90)、胎牛血清、RPMI1640培养液、台盼蓝、AO-PI染剂；实验仪器超净工作台(苏州净化集团安泰公司)；CO2细胞培养箱(上海跃进医疗器械厂)；倒置显微镜(OLYMPUS-CK2，Japan)；自动双重纯蒸馏水器(上海强申生化仪器厂)；电热恒温水浴箱(北京医疗设备厂，GB11241-89)；透射电镜(日产JEM-1230型)；荧光显微镜；光学显微镜(OLYMPUS，Japan)；离心机(上海安亭科学仪器厂)。
1.2 方法
1.2.1 细胞培养 细胞培养细胞用RPMI1640培养基，加入10%小牛血清、100U/mL青霉素及链霉素100μg/mL，细胞呈贴壁生长。于37℃、5%CO2饱和湿度条件孵箱孵育，每2～3天换液一次。传代培养时，将处于对数生长期的细胞弃尽培养液，加入新鲜的0.25%胰酶消化37℃孵育5min，待细胞脱壁后加入新鲜的含小牛血清的培养液中止胰酶反应，抽提重悬细胞，分置细胞于新的培养瓶中，传代比例为1∶3；制成细胞悬液，离心后加培养液10mL重悬细胞，取0.5mL进行活细胞计数 ......
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