HPV 16,HPV 18,HSV-2多重感染与宫颈癌的相关性研究(2)
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1.3.3 mRNA的荧光定量PCR反应 反应条件93℃ 3min，93℃ 30s，55℃ 45s，72℃ 45s，共40个循环。反应体系：5×SYBR Green Ⅰ PCR buffer 10μL上游引物F(10pmol/μL)1μL、下游引物R(10pmol/μL)1μL、dNTPs(10mM)1μL、Taq 酶(3U/μL)1μL、 cDNA 5μL、ddH2O31μL、总体积：50Μl PCR buffer成分：10mM Tris-HCl(pH 8.0)，50mM KCl，2mM MgCl2，反应结束后取反应产物5L10μL做常规凝胶电泳分析(40V电泳6n)。
1.4 统计学处理
数据处理采用SPSS17.0汉化版软件，数据记录采用 [n(%)]，统计学方法采用卡方检验，检验水准α=0.05，P<0.05为差异具有统计学意义。
2 结果
2.1 两组患者HPV16、HPV18、HSV-2感染情况比较
宫颈癌组HPV16、HPV18、HSV-2感染阳性率高于对照组，差异具有统计学意义。见表1。
2.2 两组患者单独感染及多重感染率比较
宫颈癌组感染率、单独感染率及混合感染率高于对照组，差异具有统计学意义。见表2。
2.3 HPV16、HPV18、HSV-2多重感染与宫颈癌肿瘤分期的相关性
HPV16、HPV18、HSV-2单独感染与多重感染与宫颈癌组织FIGO分期相关检验结果显示，HPV16、HPV18、HSV-2多重感染与宫颈癌分期具有相关关系。见表3。
2.4 HPV16、HPV18、HSV-2多重感染与宫颈癌肿瘤分化的相关性
HPV16、HPV18、HSV-2单独感染与多重感染与宫颈癌分化程度相关检验结果显示，HPV16、HPV18、HSV-2多重感染与宫颈癌组织的分化程度存在相关关系。见表4。
3 讨论
宫颈癌是常见的妇科肿瘤，宫颈癌的发生与生殖道的病毒感染密切相关，HPV是宫颈部位最常见的感染病毒， HPV感染能够引起机体多种形式的损伤，宫颈感染HPV后病毒DNA能够同宫颈上皮细胞DNA整合，激发自身的免疫系统，对病毒进行清除，但同时也引发局部的上皮损伤，引起宿主细胞的增殖异常[2]，发生不典型增生直至癌变。HPV的E系列蛋白与宫颈癌密切相关。E5蛋白能够引起生长因子的信号级联放大，动物实验表明[3]，E5蛋白能够通过配体依方式激活细胞生长因子受体，引起高危型HPV16感染的小鼠皮肤基底层细胞DNA过度合成、细胞异常增殖直至发生癌变。能够通过影响生长因子的磷酸化过程延缓细胞生长因子的降解，并能够上调生长因子受体的表达和功能，进而发挥促进细胞的增殖作用[4]。高危型的HPV的反复感染导致的上皮损伤是引发宫颈癌危险因素之一。HPV 16及HPV 18均是引发宫颈癌的高危亚型，研究结果显示[5]，高危型HPV感染率的增加是导致我国宫颈癌发病年轻化和宫颈癌发病率上升的主要原因之一。
近年来研究显示，HPV混合感染是常见的感染形式，多重感染能够大大增加患者患宫颈癌的风险级别。HSV-2是宫颈组织常见的感染病毒，并且能够增加宫颈癌的发病风险，最近的研究发现，HSV-2在宫颈癌的发生中并未单独发生作用，HSV-2可能为宫颈癌HPV病因发病学中的辅助因素[6]。HSV-2感染能够加速HPV复制，并增加整合HPV-DNA序列[7]，增加高危型HPV致癌的风险。在两组资料的对比中发现，宫颈癌组的HPV16、HPV18、HSV-2单独感染及多重感染的阳性率均高于对照组，提示HPV16、HPV18、HSV-2单独感染及多重感染是宫颈癌的发病致病原因之一。
虽然病毒感染与宫颈癌的发病存在明确的相关关系，但是宫颈的病毒感染对宫颈癌进展的影响目前尚存在较大的争议，大多数学者认为，HPV感染的病毒载荷量同宫颈上皮的病例损伤程度相关[8]，HPV的感染程度不同能够导致宫颈病变进展的结果差异，我们在研究中发现，HPV16、HPV18、HSV-2多重感染同宫颈癌的分期及病理分化存在相关关系，说明病毒的多重感染可能是宫颈癌进展的危险因素，对此进行干预可能为宫颈癌提供良好的治疗前景。
[参考文献]
[1] Wael I Al-Daraji，John HF Smith. Infection and cervical neoplasia：facts and fiction[J]. Int J Clin Exp Pathol，2009，2：48-64.
[2] Longworth WS，Laimins L. Pathogenesis of human papillo-mavirus in differentiating epithelia[J]. Mircrobiol Mol Biol Rev，2004，68(2)：362-372.
[3] Williams SMG，Disbrow GL，Schlegel R，et a1. Requirement of epidermal growth factor receptor for hyperplasia induced E5 ......
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