Toll3受体在呼吸道合胞病毒感染中作用的实验研究(2)
 |
| 第1页 |
参见附件(3072KB，3页)。
1.3 统计学处理
采用SPSS11.5软件包处理数据，数据以(x±s)表示，多个样本采用单因素方差分析，P < 0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 TLR3 mRNA在各组中表达与时间的关系
RT-PCR测定结果(图1)，RSV组TLR3 mRNA的表达上调并且有时间依赖性。与正常组对比，RSV组TLR3 mRNA的表达量逐渐增加，感染4 h后TLR3 mRNA也升高，有统计学差异，8 h后有显著升高，24 h达到最高峰，是基础表达量5倍以上，升高均有显著性差异；TLR3+RSV组TLR3 mRNA的表达虽然上调，但较RSV感染组明显降低，具有显著性差异。见表2。
2.2 IFN-α mRNA在各组中表达与时间的关系
测定结果表明，正常组中IFN-α mRNA表达基线低，RSV感染组IFN-α mRNA的表达明显上调并且具有时间依赖性。与正常组比较，RSV感染组IFN-α mRNA的表达量逐渐增加，IFN-α mRNA在感染4 h后开始升高，24 h后达到最高峰；与RSV感染组相比较，TLR3+RSV组，IFN-α mRNA的表达虽然上调，但相对较低具有统计学差异。见表3。
2.3 IFN-β mRNA在各组中表达与时间的关系
A549正常细胞IFN-β mRNA表达基线很低，RSV组IFN-β mRNA的表达上调且有时间依赖性。与正常组对比，RSV感染组IFN-β mRNA的表达量逐渐增加，感染4 h后IFN-β mRNA开始升高，12 h后明显，24 h后达到最高峰，具有显著性差异；而TLR3+RSV组，IFN-β mRNA的表达虽然上调，但明显低于RSV感染组，感染12 h后降低具有统计学意义，24 h后降低具有显著性差异。见表4。
3 讨论
呼吸道合胞病毒(RSV)是造成世界范围内婴幼儿下呼吸道感染的首位病毒病原，文献报道每年全球有6 400万人感染，有(300～500)万死亡，65%儿童在1岁内感染，2岁时感染率超过90%，每年约40%～50%住院治疗的喘息性支气管炎及25%肺炎患儿是RSV感染，早产儿、先天性心脏病、支气管肺发育不良、免疫缺陷病患儿合并RSV感染病情严重，严重时可导致死亡，同时，RSV感染与哮喘的发生发展密切相关。到目前为止，尚无有效治疗和预防方法[5-8]。
Toll样受体是近年来发现在抗感染及免疫反应起到重要作用的受体蛋白，是细胞跨膜受体，属于白介素-1受体(IL-1R)超家族成员之一。能识别和启动不同病原体的相关模式分子(PAMPs)，介导先天性免疫和调节适应性免疫应答来抵御病毒的感染[9]。IFNα/β属I型干扰素，是发挥早期抗病毒和免疫刺激活性的主要效应分子。RSV F蛋白作为第一个被发现的TLR3所识别病毒性PAMP，在抗病毒、阻止病毒复制及保护机体过程中起到重要作用[4]。
本研究证实了RSV感染可显著上调A 549细胞TLR3和Ⅰ型干扰素的表达，而且其上调作用和RSV感染之间有明显的时间依赖关系。有文献研究表明，RSV感染宿主细胞不仅可以使TLR3的表达上调，而且其在被感染的细胞膜上的分布量也有所增加，从而提高了宿主细胞对后来的刺激因素(如病毒、细菌等感染)的反应敏感性。RSV感染细胞后，TLR3与病毒复制和转录过程中所形成的dsRNA相结合，上调TLR3的细胞表达，在细胞膜上的分布量增加，反过来进一步与dsRNA结合，形成正反馈性调节[10]。
本研究证实，TLR3抗体能阻断TLR3活化，从而使RSV F蛋白基因的上调，揭示出TLR3的活化可以抑制RSV在感染中的复制，而达到抗病毒作用。可以为临床上治疗RSV感染及研发抗RSV新药提供理论基础。
[参考文献]
[1] Parker LC，Prince LR，Sabroe I. Translational mini review series on Toll like receptors：networks regulated by Toll like receptors mediate innate and adaptive immunity[J]. Clin Exp Immunol，2007，147：199-207.
[2] Hultcrantz M，Hhn MH，Wolf M，et al. Interferons induce an antiviral state in human pancreatic islet cells[J]. Virology，2007，367(1)：92-101.
[3] Meylan E，Tschopp J. Toll-like receptors and RNA helicases：two parallel ways to trigger antiviral responses[J]. Mol Cell，2006，22(5)：561-569.
[4] 刘菊，杨春，唐安芬，等. 呼吸道合胞病毒Long株的培养及应用[J]. 微生物学杂志，2004，24(5)：47-49 ......
您现在查看是摘要介绍页，详见PDF附件(3072KB，3页)。