喉癌组织的蛋白质组学比较研究(1)
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[摘要] 目的 通过对人类的喉癌组表达差异中的高、低分化癌组之间的相互差异性的研究，运用网上数据库对不同蛋白点的肽指纹图进行分析和鉴定。 方法 选取本院耳鼻喉科2011年1~5月喉癌患者的病理临床资料进行回顾性分析与研究。 结果 随机将新鲜喉癌标本分为高分化癌组和低分化癌组，并提取两组的组织总蛋白进行双向凝胶电泳分析，将分析结果与正常黏膜组织对照，将得到的高分化与低分化癌组织之间的表达式进行比较分析。 结论 高分化癌组织与低分化癌组织的表达显示，喉癌细胞的分化程度与蛋白质组学的关系极为密切。
[关键词] 喉癌；蛋白质组学；双向凝胶电泳
[中图分类号] R739.65 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701(2012)06-0031-03
Comparative proteomic analysis of differentiation cancer of larynx
LV Jingyao LI Zhihai CAI Zhiyi
Department of Otolaryngology, Taizhou Hospital in Zhejiang Province, Taizhou 318000, China
[Abstract] Objective To study on differences of human laryngeal carcinoma group expression in high, low cancer group, using online databases of different protein spots of the peptide fingerprint analysis and identification. Methods Analysis and study on ENT pathology retrospectively clinical data from 2011 January to 2011 May in our hospital. Results The fresh specimens of laryngeal carcinoma classified as well-differentiated cancer group and the low differentiation cancer group. The extraction of two groups of tissue protein, for two-dimensional gel electrophoresis, compared to the normal mucosa tissue. Conclusion High differentiation carcinoma and poorly differentiated cancer tissues expression shows, laryngeal cancer cell differentiation and proteomics have very close relationship.
[Key words] Laryngeal cancer; Proteomics; Two-dimensional gel electrophoresis
目前喉癌的发病率约占全身恶性肿瘤的5%，是头颈部肿瘤中较为常见的恶性肿瘤，喉癌的总体生存率低，就算积极投入治疗，现阶段的医疗水平对其生存率并无明显改善。近年来，随着经济的发展，人类的生存环境日趋恶化，喉癌的发病率也呈现逐年递增的趋势。蛋白质组学是从整体上研究其在不同时间和空间中所发挥的功能及蛋白质间的相互作用的一门新兴的学科，其特征就是建立双向电泳差异图谱，采用透视全体基因在特定细胞或组织的动态表达的分析方法，从而达到解释蛋白质功能与细胞生命活动的规律[1-3]。另外,还有部分的实验室将研究的结果建立了数据库，以利于蛋白质组学技术在肿瘤研究的中临床应用。本文选取本院耳鼻喉科2011年1~5月喉癌患者的病理临床资料6例进行回顾性分析与研究，通过运用网上数据库对人类的喉癌组织表达差异中的高、低分化癌组之间的相互差异性的研究，从而达到对不同蛋白点的肽指纹图的分析和鉴定，并总结分析，现报道如下。
1 资料与方法
1.1 临床资料
选取本院耳鼻喉科2011年1~5月喉癌患者的临床资料6例进行回顾性分析与研究。6例喉癌患者中，男4例，女2例，年龄30～60岁，病理结果显示其病理组织来源于鳞状上皮组织，其中高分化鳞癌2例，低分化鳞癌4例。6例患者均作为蛋白质组研究的组织标本,同时选取对侧未被肿瘤侵犯的正常喉室或室带黏膜作为对照组的正常黏膜，6例配对的癌旁正常喉黏膜组织均距离肿块边缘达5 cm以上。
1.2 研究方法
1.2.1实验的试剂与仪器的备用 组织物备用：将所有选取的喉癌组织及正常黏膜均用冰盐水清洗干净，滤纸吸去多余的液体1 min后将其置于-70℃冰箱保存备用，此项过程的处理需于组织离体后30 min内完成。
试剂备用：选用超纯尿素(urea)、甘氨酸(glycine)、硫脲(sulfocarbamide)、四甲基乙二胺(TEMED)、十二烷基磺酸钠(SDS)和低分子量蛋白标记Tris碱、pH 3～10固相化线性17 cm干胶条(IPG strip)购自Bio-Rid公司 ......
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