免疫磁珠分选系统在分离肝癌干细胞中的应用
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2012年7月15日
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葛丽丽 杨小昂 戈士文 郑州大学医药科学研究院;河南省肝病药理重点实验室;
【摘要】目的为进一步研究肝癌干细胞的特性,应用免疫磁珠分选系统分离纯化肝癌细胞系Huh-7中的肝癌干细胞。方法采用EpCAM单克隆抗体包被的微小磁珠(平均直径≤50 nm)标记Huh-7细胞,通过免疫磁珠分选系统分离EpCAM(epithelial cell adhesion molecule,EpCAM)阳性的肝癌干细胞,以流式细胞术检测分离后的肝癌干细胞纯度,以台盼蓝染色法检测细胞活性。结果采用流式细胞仪检测分离前肝癌细胞中EpCAM阳性细胞比率为(13.3±1.106)%,分离后的肝癌干细胞中EpCAM阳性细胞比率达到(99.5±0.200)%,细胞存活率为(96.5±1.518)%。结论采用免疫磁珠分选系统分离肝癌干细胞操作简便、快速有效,为肝癌干细胞的进一步研究奠定了基础。
【关键词】 肝癌干细胞 免疫磁珠分选系统 EpCAM
【基金】河南省2007年科技发展计划(072300450060) 2007年度河南省医学科技攻关项目(200703087)
【分类号】R735.7
肝癌干细胞的发现为肝癌研究打开了新的思路。肝癌干细胞的分离纯化对肝癌干细胞的进一步研究和探索至关重要[1]。EpCAM是最近发现的一种新的肝癌干细胞标志物,分子量为40 kD的跨膜糖蛋白,可通过促进细胞增殖、免疫逃逸等机制促成肿瘤发生,与肿瘤迁移和侵袭性密切相关[2,3]。
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