依达拉奉预处理对兔肺缺血再灌注损伤后肺水肿的影响(1)
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[摘要] 目的 探讨依达拉奉对兔肺缺血再灌注损伤后肺水肿的保护作用及可能机制。 方法 建立兔肺缺血再灌注动物模型。家兔40只，随机分为4组。ED组和VC组分别给予依达拉奉和维生素C预处理；CO组行左肺缺血再灌注；SH组只开胸并带套。各组在缺血1 h并再灌注2 h后分别检测SOD、MDA、iNOS和eNOS。取部分左肺下叶，测量肺W/D、肺含水量和MPO。静注伊文思蓝，比较通透性。 结果 再灌注后ED组的SOD、eNOS高于VC组和CO组；ED组的MDA、iNOS、肺W/D、肺含水量、MPO及伊文思蓝含量低于VC组和CO组。 结论 依达拉奉能减轻肺缺血再灌注损伤后肺水肿的程度，具有肺保护作用。
[关键词] 依达拉奉；肺缺血再灌注损伤；肺水肿；兔
[中图分类号] R96 [文献标识码] A [文章编号] 1673-9701(2013)01-0001-04
自从McCord[1]提出了缺血再灌注损伤(ischemia-reperfusion-injury，IRI)的概念以来，对各器官组织的缺血再灌注损伤的研究一直成为医学领域的重点和难点。其中，肺IRI的重要原因之一就是氧自由基形成。依达拉奉是一种新型自由基清除剂，对脑、心脏、肢体等多种组织器官的IRI有保护作用。本研究拟通过建立兔肺IRI动物模型，观察依达拉奉对肺IRI后肺水肿的减轻作用，探讨其可能机制，并为临床治疗提供参考。
1 材料与方法
1.1 实验动物
10～12周龄健康家兔40只，雌雄兼用，体重2.5～3.0 kg，由齐齐哈尔医学院动物实验中心提供。
1.2 主要材料
动物人工呼吸机(DW-2000型，上海嘉鹏)；生物机能实验系统(成都泰盟)；电热恒温干燥箱(上海新诺)；台式离心机(湖南湘仪)；血气分析仪(美国IL公司GEM-premier 3000)；超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)、丙二醛(malondialdehyde，MDA)、诱导型一氧化氮合成酶(inducible nitric oxide synthase，iNOS)试剂盒和髓过氧化物酶(myeloperoxidases，MPO)试剂盒(南京建成)；内皮型一氧化氮合成酶(endothelial nitric oxide synthase，eNOS)试剂盒(北京华耐特)；伊文思蓝(evens blue)(上海沪宇)；依达拉奉(edaravone)注射液(昆明积大，国药准字H20080466)；维生素C(vitamin C)注射液(哈药集团三精制药，国药准字H23021170)。
1.3 动物模型制备及分组
经耳缘静注25%乌拉坦进行麻醉。颈正中切开皮肤，游离气管，作T型口，4.5F气管插管并结扎固定，连接呼吸机行机械通气，呼吸参数如下：频率为30次/min，吸呼比为1：1，潮气量为15 mL/kg，氧浓度为21%。稳定15 min后开始模型复制。生理盐水(0.5 mL/min)持续静滴；剪断第3～6肋软骨及腋后线肋骨以暴露左胸腔器官，切开左胸膜，断其左下肺韧带，游离肺门，以7-0线作为阻断带将左肺门套带以备阻断左肺门用；并行全身肝素化。
随机分为4组(2组实验组、1组对照组和1组假手术组)，每组10只。依达拉奉组(ED组)：于呼气末时阻断左肺门造成左肺缺血状态，1 h后松开阻断带，左肺恢复灌注并复张后观察2 h；阻断左肺门前5 min经股静脉滴注依达拉奉(5 mg/kg)，2 min内静注完；维生素C组(VC组)：手术过程同ED组，阻断左肺门前5 min经股静脉滴注维生素C(0.5 g/kg)，2 min内静注完；对照组(CO组)：手术过程同ED组，不给予任何药物；假手术组(SH组)：开胸后仅游离左肺门，不阻断肺门，观察3 h。各组术中自颈总动脉插管，用于监测生命体征和采血。
1.4 检测指标
1.4.1 动脉pH值与静脉血氧分压(PvO2)测定 ED组、VC组和CO组在缺血前、再灌注30、60、90和120 min及SH组在其对应时间点上分别取颈总动脉血和左下肺静脉血作血气分析检测静脉血氧分压(PvO2)与动脉血pH值。
1.4.2 血浆SOD、MDA、iNOS和eNOS值测定 ED组、VC组和CO组在缺血前、再灌注60和120 min及SH组在其对应时间点上取左下肺静脉血检测SOD、MDA、iNOS和eNOS，具体步骤按试剂盒要求进行；并测算各生化指标在缺血前与再灌注120 min后的差值，比较抗氧化效果。
1.4.3 肺湿干重比(W/D)与肺含水量测定 ED组、VC组和CO组在缺血1 h、再灌注2 h，SH组在开胸3 h于近肺门处结扎并切取部分左肺下叶相同部位组织约500 mg ......
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