miR—21联合CA153、CA125、CA199检测在乳腺癌早期诊断中的价值研究(1)
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[摘要] 目的 研究miR-21联合3C肿瘤标志物检测在乳腺癌患者诊断中的应用价值。 方法 选择乳腺癌患者作为观察组、乳腺良性疾病患者作为良性对照组、健康体检者作为健康对照组，检测外周血中CA125、CA199、CA153与miR-21的含量。 结果 观察组患者miR-21、CA125、CA153、CA199水平明显高于良性对照组和健康对照组，并且呈现出TNMⅠ期>Ⅱ期>Ⅲ期>Ⅳ期；四项指标联合检查灵敏度87.5%、特异度94.5%，均高于四项指标单独检测。 结论 miR-21参与了乳腺癌发生的生理、病理过程，可以作为乳腺癌早期诊断的肿瘤标志物，联合CA125、CA199和CA153检查能提高乳腺癌诊断的灵敏度和特异度，具有积极的临床价值。
[关键词] 乳腺癌；肿瘤标志物；miR-21
[中图分类号] R737.9 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701(2013)01-0067-03
乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤，早期诊断可以为患者争取保乳手术的机会，对于提高生活质量和社会功能具有积极意义。近年来，肿瘤标志物逐渐成为乳腺癌领域的研究热点，3C肿瘤标志物的检测研究与报道很多，但对于miRNA的研究很少。越来越多的证据表明，miRNA的分析可以用于恶性肿瘤的早期诊断、预后判断和治疗[1]。为了阐述乳腺癌组织中miR-21表达的差异性，本文以miR-21联合CA153、CA125、CA199 3C标志物检测的方式，探讨miR-21作为乳腺癌肿瘤标志物早期诊断的可能性及应用价值。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选择2007年10月30日～2011年10月30日期间在我院就诊的120例乳腺癌患者作为本研究的观察组，年龄33～51岁，平均(41.42±5.62)岁。入选标准：①有乳头溢液的临床症状，通过体格检查发现乳房肿块；②B超、钼靶X线发现乳腺肿块；③乳腺结节穿刺活检术确诊为乳腺癌。收住院后，根据活检结果选择保乳手术、乳腺癌改良根治术以及化疗后保乳手术等不同治疗方案。选择100例同期在我院就诊的乳腺良性疾病患者作为良性对照组，年龄30～50岁，平均(40.17±6.05)岁；选择100名同期在我院体检的健康女性作为健康对照组，年龄30～50岁，平均(41.58±5.87)岁。三组受试者的年龄、全身情况等差异均无统计学意义(P > 0.05)，具有可比性。
1.2 检查方法
观察组和良性对照组在入院时采集静脉外周血5 mL、健康对照组在体检时采集静脉外周血5 mL，加入EDTA抗凝后于4℃、3 000 rpm离心10 min，收集上清保存于-80℃待检。采用Roche Elecsys 2010全自动电化学发光仪及相应试剂盒进行检测。首先配制浓度梯度的标准品并于全自动电化学发光仪上检测发光强度，绘制发光强度-样本浓度标准曲线。然后检测患者外周血样本的发光强度，代入标准曲线后计算肿瘤标志物的含量。
1.3 判断标准
按照下列标准判断检查结果为阳性：CA153>25 U/mL、CA125>35 U/mL、CA199>35 U/mL。miR-21以snRNA的量为内参照，求得miR-21的相对量，计算公式为：F=2-△△Ct，△△Ct=(Ct miR-21/155-CtU6ncRNA)肿瘤/血清-(CtmiR-21/155-CtU6ncRNA)[2]四项指标联合检查，当有3项或以上为阴性即判断为阴性、当有3项或以上为阳性即判断为阳性。灵敏度=真阳性人数/(真阳性人数+假阴性人数)×100%，特异度=真阴性人数/(真阴性人数+假阳性人数)×100%。
1.4 统计学方法
采用SPSS 18.0软件对上述数据进行统计学分析，计量资料采用方差分析，计数资料采用χ2检验，P < 0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 三组待检者外周血肿瘤标志物水平比较
通过方差分析及两两比较可知，观察组患者CA199、CA125、CA153、miR-21水平明显高于良性对照组(P = 0.031 7、0.039 8、0.043 8、0.036 5)和健康对照组(P = 0.028 9、0.037 8、0.040 8、0.033 8)。见表1。
2.2 不同TNM分期观察组患者外周血肿瘤标志物水平比较
通过方差分析和两两比较可知，CA199、CA125、CA153、miR-21水平均呈现出TNM Ⅰ期>Ⅱ期>Ⅲ期>Ⅳ期(P < 0.05)。见表2。
2.3 四种肿瘤标志物灵敏度与特异度
CA125、CA153、CA199、miR-21四项指标联合检测灵敏度87.5%、特异度94.5%，均高于四项指标单独检测。
3 讨论
乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤，全世界每年有120万妇女发生乳腺癌，50万死于乳腺癌，严重影响患者的生活质量。该病在20岁以前较为少见、20岁以后发病率迅速上升，多发于40～60岁、尤其是更年期和绝经期前后的女性[3]。乳腺癌在我国具有发病率增长快、死亡率增长速度快、治疗水平低、对普查的认识差的特点。近年来随着各项辅助检查技术的发展，乳腺癌的普查得到一定的推广，这也使得乳腺癌的早期诊断和保乳手术的开展提供了条件[4]。但是，由于B超、钼靶以及磁共振等检查很难发现早期较小的乳腺癌病灶，因此疾病的早期诊断率并不理想。很多患者在出现典型的临床症状后，才能通过相应的辅助检查确诊，致使患者错过了保乳手术的最佳时机 ......
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