1.5.2 碱性磷酸酶活力检测 在共培养的第1、7和14天，每组取出3个样本，PBS液冲洗后，0℃下在含有EDTA和巯基乙醇的细胞裂解液中消化30 min。离心，得上清液，超声仪高频声波裂解，4℃离心(12 000转/5 min)。取100 μL上清液并与400 μL的P-硝基苯磷酸混合，37℃下孵育15 min后50 μL NaOH终止反应。紫外分光光度计在450 nm波长下测定吸光度。

    1.5.3 实时定量PCR 骨钙蛋白是检测成骨细胞成熟分化的标志物。各实验组分别在培养第1、7和14天进行RT-PCR检测。引物序列如下。

    1.6 统计学分析采用IBM SPSS17.0软件，对各组数据进行t检验及方差分析。P <0.05为差异有统计学意义。

    2 结果

    2.1 成骨细胞和骨髓基质干细胞的生长情况及ALP染色倒置显微镜下观察BMSCs呈梭形和纺锤形；OB呈卵圆形，培养瓶中可见典型的铺路石样。倒置显微镜下可见骨髓基质干细胞成骨分化能力良好。

    2.2 OB-APA的形态学观察

    倒置显微镜下观察到微囊完整性好 ......