大鼠骨髓间充质干细胞的体外分离培养与鉴定(1)
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[摘要] 目的 建立大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow-derived mesenchymal stem cells，BMSCs)体外分离培养方法。方法 采用全骨髓贴壁法分离培养BMSCs，进行形态学观察，绘制生长曲线，流式细胞仪分析细胞周期、检测细胞表面抗原标志物，并进行成脂、成骨分化诱导。 结果 获取的BMSCs形态呈均一成纤维细胞样，并呈集落样生长。生长曲线呈S形，细胞周期显示86.02% P3代细胞为G0/G1期，保持活跃的扩增能力。BMSCs 高表达CD44、CD90、低表达CD34、CD45。成脂诱导21 d后，可见细胞的胞浆内出现大量红染脂滴。成骨诱导21 d后，可见大量橘红色矿化结节形成。结论 全骨髓贴壁培养法可成功有效地分离培养BMSCs。
[关键词] 骨髓间充质干细胞；全骨髓贴壁法；鉴定
[中图分类号] R329.2 [文献标识码] A [文章编号] 1673-9701(2014)01-0007-04
BMSCs具有高度增殖的能力、体外基因转移效率高以及多向分化潜能等优点[1-2]，使其成为组织工程、细胞替代治疗等领域的首选种子细胞。但是骨髓中的间充质干细胞含量极低[3]，且其含量随年龄增长而逐渐减少[4]，需经体外分离、纯化、扩增为纯度高、活力强、生物特性均一的间充质干细胞才能满足组织工程需求。实验旨在建立一套简便有效的BMSCs原代培养方法，为后续实验做好准备。
1 材料与方法
1.1 实验动物
清洁级雄性SD大鼠6只 ......
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李兰兰 陈玲肖 马炬明 浙江中医药大学第二临床医学院;解放军第一一七医院消化内科;
【摘要】目的建立大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow-derived mesenchymal stem cells,BMSCs)体外分离培养方法。方法采用全骨髓贴壁法分离培养BMSCs,进行形态学观察,绘制生长曲线,流式细胞仪分析细胞周期、检测细胞表面抗原标志物,并进行成脂、成骨分化诱导。结果获取的BMSCs形态呈均一成纤维细胞样,并呈集落样生长。生长曲线呈S形,细胞周期显示86.02%P3代细胞为G0/G1期,保持活跃的扩增能力。BMSCs高表达CD44、CD90、低表达CD34、CD45。成脂诱导21 d后,可见细胞的胞浆内出现大量红染脂滴。成骨诱导21 d后,可见大量橘红色矿化结节形成。结论全骨髓贴壁培养法可成功有效地分离培养BMSCs。
【关键词】 骨髓间充质干细胞 全骨髓贴壁法 鉴定
【基金】浙江省科技计划项目(2011C13029-1)
【分类号】R329.2
BMSCs具有高度增殖的能力、体外基因转移效率高以及多向分化潜能等优点[1-2],使其成为组织工程、细胞替代治疗等领域的首选种子细胞。但是骨髓中的间充质干细胞含量极低[3],且其含量随年龄增长而逐渐减少[4],需经体外分离、纯化、扩增为纯度高、活力强、生物特性均一的间充质
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