兔颈动脉外膜剥离血管出血的动物模型(2)
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Kunio等[3]、Rall等[4]采用单纯的外科手术锐性损伤血管导致血管出血。该手术方法难度较大，由于器械直接损伤血管全层，操作过程中易导致动脉瘤形成、血管直接破裂，出现不可控制出血。国内牟华明等[5]也曾尝试采用刀片刮除的方法去除血管外膜，由于刀片刮除外膜对血管牵张作用强，易刮伤血管壁造成机械损伤、出血。在预实验的过程中，研究发现器械直接锐性刮剥血管易导致血管破裂、出血迅速、出血量大、无法定量测定、实验动物迅速死亡。
汤月霞等[9]、胡远程等[10]采用胶原酶消化血管外膜方法，发现胶原酶消化血管外膜30 min后，血管外膜变为白色，HE染色下发现外膜较消化前明显疏松，容易用器械钝性剥离。剥离至外膜白色疏松组织消失的程度，HE染色下发现外膜基本剥离干净。
本实验采用胶原酶消化+眼科镊剥离血管外膜方法，使血管结构破坏，导致血管出血。考虑到实验的操作性、实验数据的量化，我们选取了供血丰富、分支较少、位置相对表浅易暴露的兔颈动脉，在预实验过程中发现兔颈动脉较腹主动脉、股动脉等大动脉便于操作，暴露充分，对周围组织影响小，出血量可达满意效果。
1g/L浓度组实验侧60 s渗出量与阴性对照侧相差不大，通过HE染色发现，血管外膜仍残留部分结缔组织，外膜滋养血管未裸露，提示1g/L浓度胶原酶消化血管外膜不彻底，经眼科镊钝性剥离后，血管无明显出血。2 g/L胶原酶组实验侧60 s渗出量与阴性对照侧有显著差异，HE染色发现，血管外膜结缔组织剥离彻底，外膜滋养血管广泛裸露，内膜及中膜无破坏，提示2 g/L胶原酶消化外膜彻底，经眼科镊钝性剥离后，外膜滋养血管广泛出血，出血量稳定，且有统计学意义。4 g/L浓度组60 s出血量已超过纱条吸附液体量，且血管破裂，实验动物迅速死亡，提示4 g/L胶原酶消化外膜过度。
综上所述，2 g/L胶原酶消化+眼科镊钝性剥离血管外膜可导致外膜滋养血管广泛破坏，而血管中膜及内膜结构未破坏，出血量及出血速度稳定，实验操作可重复性及操作性好，因此可以成为一种评估局部止血药物效果的稳定、理想的出血模型。
[参考文献]
[1] Vuceli D，Pesko P，Stojakov D，et al. Systemic hemostatic drugs[J]. Acta Chirurgica Iugoslavia，2007，54(1)：177-195.
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