ERCC1和RRM1的表达对Ⅱ~Ⅳ期非小细胞肺癌术后吉西他滨联合顺铂化疗生存趋势的影响(2)
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1.2 治疗方法
盐酸吉西他滨(又名泽菲,江苏豪森药业股份有限公司, 国药准字H20030105),根据体表面积(BSA)调整剂量:1 000 mg/m2静脉滴注30 min,每周1次,连续3周,随后休息1周,每4周重复1次。联合顺铂25 mg/m2静滴qd,d1~3化疗,每3周重复。最多接受6个周期化疗。
1.3 非小细胞肺癌组织中ERCC1、RRM1表达的检测 1.3.1 检测方法 实时荧光定量PCR法。
1.3.2 检测原理 在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析。
1.3.3 仪器 荧光PCR仪ABI7500 ABI公司。
1.3.4 试剂 TOYOBO公司:ReverTraqPCRRTkitFSQ-101Hotstar Taq Polymerase。
1.3.5 操作步骤 ①收集石蜡切片上的相应组织部分到1.5 mL离心管中,加入1 mL的组织透明液进行脱蜡,利用无水乙醇去除组织透明液。风干后使用试剂盒,加入蛋白酶和裂解液后加热裂解,再加入DNA酶去除DNA,通过利用离心柱得到RNA,最后加入溶解液通过高速离心得到RNA。②逆转录:逆转录的体系是10 μL,其中5×RT Buffer2 μL,RT Enzyme-Mix 0.5 μL,PrimerMix 0 ......
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