1材料与方法

    1.1 实验动物

    24只健康雌性SD大鼠由山西医科大学生理实验室提供，体重220～250 g。随机分三组，每组8只：A组不做任何处理；B组行阴道扩张模拟难产；C组模拟难产加双侧卵巢切除。4周后经检测建模是否成功(尿动力学检测和喷嚏实验证实 )，见表1。

    1.2 标本采集及处理

    造模成功后常规喂养4周后将大鼠处死，取阴道前壁组织两块，约0.5 cm×0.5 cm×0.5 cm，反复、多次用生理盐水洗净，一块放入加有中性缓冲液的10%的甲醛液中固定，准备行免疫组织化学检测。另一块立即放入-80℃液氮中，以避免mRNA降解，待行实时荧光定量TR-PCR技术检测。

    1.3 试剂

    羊抗兔CTGF、整合素β1和β-actin多克隆抗体(博奥森生物技术有限公司)，辣根过氧化酶的山羊抗鼠二抗(购于北京中杉金桥公司)，试剂盒、RT-PCR盒及相关试剂(北京全式金生技术有限公司)，引物(北京博大泰克生物技术公司)。

    1.4 免疫组织化学检测CTGF及整合素β1蛋白的表达

    采用SABC法进行免疫组织细胞化学染色 ......