肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体对非小细胞肺癌细胞凋亡诱导的实验研究(2)
1.2 方法1.2.1 细胞培养及处理 细胞解冻后,RPMI1640培养基上传代培养6代,转移分组,每组细胞浓度约为1×105个/mL,观察至对数生长期后,计数细胞浓度后将细胞按每孔1×104个/200 μL接种于96孔板,继续培养24 h。
1.2.2 TRAIL溶液及药物处理 ①单用组:A549细胞贴壁生长后加入新鲜配制的含不同浓度的TRAIL(1、10、100、1000 μg/L)培养液,对照组为同浓度的培养液添加到贴壁生长的Jurkat细胞培养基中,两组均置于37℃ CO2培养箱中24 h;②联合组:联合化疗药物组取含100 μg/L TRAIL的培养液3份9 mL,分别加入阿霉素(5 μmol/L)、顺铂(10 μmol/L)、紫杉醇(5 μmol/L)1 mL,混合后用于培养A549贴壁细胞;单用化疗药物组为不含TRAIL的培养液加入上述3种同等浓度剂量的药物后,培养A549贴壁细胞,均置于37℃ CO2培养箱中培养24 h。
1.2.3 细胞活性检测 每个培养基均分为两组,一组用MTT法测定细胞活性 ......
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