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编号:12558894
肠道病毒71型(EV71)的检测(2)
http://www.100md.com 2015年7月15日 《中国现代医生》 2015年第20期
     1.3方法

    ①胶体金法:采用胶体金免疫层析技术原理[5],在金标垫上包被胶体金标记的鼠抗人IgM。用于定性检测全血、血清或血浆样品中的肠道病毒71型IgM抗体(EV71-IgM)。检测阳性样品时,样品中的肠道病毒71型IgM抗体可与胶体金标记的鼠抗人IgM结合,形成免疫复合物,由于层析作用复合物及样品在硝酸纤维素膜内部向前流动,当复合物经过T线时与包被的重组EV71-Ag结合,形成“Au-鼠抗人IgM- EV71-IgM-EV71-Ag”而凝集显色、剩余的胶体金标记的鼠抗人IgM与C线处包被的羊抗鼠IgG抗体结合而凝集显色,检测阴性样品时,样品中不含肠道病毒71型IgM抗体,致使不能形成免疫复合物,则只能在C线处显色。②ELISA法:采用捕获法原理检测人血清或血浆样品中肠道病毒71型IgM抗体(EV71-IgM),微孔中预包被鼠抗人IgM(μ链)。首先加入待检标本的血清或血浆样品后,样品中的IgM抗体都可被捕获,未结合的其他成份(包括特异性的IgG抗体)将被洗涤除去;第二步:加入肠道病毒71型抗原标记酶,被捕获的IgM中的EV71-IgM会与辣根过氧化物酶标记的EV71重组抗原特异性结合,洗去其他未结合物 ......
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