KDM1A对胃癌侵袭转移能力的影响(2)
1.3 实验方法1.3.1 细胞培养 GES-1:培养条件:DMEM培养基,90%;胎牛血清,10%。气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37℃。AGS:培养条件: F-12培养基,90%;胎牛血清,10%。气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37℃。SGC-7901:培养条件:RPMI-1640培养基,90%;胎牛血清,10%。气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37℃。BGC-823:培养条件:RPMI-1640培养基,90%;胎牛血清,10%。气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37℃。
1.3.2 Western Blot实验 利用总蛋白抽提试剂盒提取总蛋白,BCA(bicinchonininc acid)法测定蛋白质浓度,取40 μg蛋白上样,200 V恒压电泳,SDS-PAGE分离,300 mA恒流、4℃转膜, 约70 min,5%PBS 37℃封闭2 h ......
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