1.2 试剂

    无氮样品保存液购自北京百泰克生物技术有限公司；Trizol试剂购自德国Invitrogen公司；GoScriPt逆转录试剂盒和GoTaqR qPCR Master Mix试剂盒均购自美国Promega公司。

    1.3 实验方法

    应用Trizol法抽提组织总RNA，提取的总RNA用紫外分光光度计测定浓度并检测质量。A260/A280在1.8～2.0范围内可认为总RNA纯度可靠。取2 μg总RNA用于逆转录合成cDNA，逆转录反应采用GoScriPt逆转录试剂盒。所获得的cDNA稀释5倍后作为模板，采用GoTaqR qPCR Master Mix试剂盒，在Mx3005P荧光定量PCR仪(Srratagene公司)上检测Rab27B mRNA的表达量。Rab27B mRNA的引物序列：上游：5'-AGGCTATTCTCTGGGATGAGTG-3'，下游：5'-TCTGCTGTATTTAAGGGCACAA-3'；外参甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)的引物序列：上游：5'-ACCCACTCCTCCACCTTTGAC-3' ......