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编号:12747513
新生鼠坏死性小肠结肠炎动物模型建立方法改进(2)
http://www.100md.com 2015年12月15日 中国现代医生 2015年第35期
     1.3.2 缺氧复氧冷刺激 于实验状态的环境模拟实验装置内充入纯氮,箱内氧气浓度降至零后迅速将新生鼠由保育状态的环境模拟实验装置中转移至实验状态的环境模拟实验装置内,持续以1.5 L/min通入氮气,维持窒息 1 min后将提前4℃预冷处理的水袋放入环境模拟实验装置内,并将装置温度调至4℃,将新生鼠放置在水袋上进行低温处理,同时,持续以1.5 L/min流量通入氧气,控制氧浓度大于50%,刺激10 min。处理后将新生鼠移回保育状态的环境模拟实验装置,每日刺激3次。

    1.3.3 LPS灌胃 LPS以10 g/kg稀释于0.1 mL灭菌水中,使用去芯留置针头通过口腔插管灌胃,每日1次,连续3 d。

    1.4 标本采集

    各组乳鼠每日定时称量体重,于造模开始后第72小时停止饲喂处死取标本。在小鼠腹部正中切开腹腔,分离肠血管及系膜。取回盲部及其远近端共5 cm肠管置入包埋盒进行石蜡包埋,所有标本采集均在冰上完成。

    1.5 肠组织病理学检查与评分

    回盲部及其远近端共5 cm肠管石蜡包埋后,作4~5 μm 连续切片,常规HE 染色,采用随机数法对每个切片进行随机编号 ......
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