LC3-Ⅱ是自噬特异性标志物，其表达水平一定程度上反映细胞自噬体情况。如图1所示，不同浓度IRN作用SH-SY5Y细胞后可以上调LC3蛋白的表达，并且有剂量依赖性，即随着IRN浓度增加，表达水平也逐渐上调，对条带进行量化后，其数值在0、6、12、24 μM组中，LC3-Ⅰ的相对β-actin表达分别为(1.69±0.16)、(1.80±0.27)、(1.57±0.15)、(1.78±0.12)，LC3-Ⅱ的表达分别为(0.086±0.02)、(0.39±0.14)，(0.96±0.09)、(1.93±0.14)。而p62的表达水平则逐渐下调，其数值在0、6、12、24 μM组中分别为(2.28±0.21)、(1.50±0.20)、(1.11±0.13)、(0.91±0.15)。提示IRN可以诱导细胞自噬发生。随后我们通过建立恒定表达GFP-LC3的细胞株，用来观察IRN处理以后GFP-LC3斑点的形成情况，如图1C所示IRN作用24 h后，可以显著诱导大量GFP-LC3斑点的形成，GFP-LC3荧光斑点数目在对照和IRN不同浓度处理组(6、12、24 μM)中分别为2±1/细胞，4±1/细胞，8±1/细胞，和14±2/细胞，IRN各浓度组与对照组比，差异具有统计学意义(n=3，P<0.05)。以上结果都证实IRN是可以引起神经元细胞SH-SY5Y自噬发生的诱导物质 ......