[摘要] 目的 探讨异钩藤碱(Isorhynchophylline， IRN)人胶质瘤细胞SH-SY5Y细胞自噬的发生及其与mTOR信号通路的关系。 方法 用不同浓度IRN(6、12和24 μmol/L)处理SH-SY5Y细胞24 h，免疫印迹法检测自噬标志性蛋白LC3-Ⅱ的表达，免疫荧光法观察微管相关蛋白轻链3(LC3)荧光斑点标记的自噬体形成，利用溶酶体稳定剂氯喹(CQ)以及自噬抑制剂3-MA进一步明确IRN作用的途径。Western蛋白印迹法检测mTOR相关蛋白和Beclin1的表达。 结果 IRN作用SH-SY5Y细胞24 h后，可显著上调LC3-Ⅱ表达，0、6、12、24 μM IRN作用后的相对表达量分别为(0.086±0.02)、(0.39±0.14)、(0.96±0.09)、(1.93±0.14)。自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的比值增高(P<0.01)，并呈浓度依赖性，SH-SY5Y细胞内GFP-LC3荧光斑点标记的自噬体增多，在IRN不同浓度处理组(0、6、12、24 μM)中分别为2±1/细胞 ......