miR—20a—5p通过调控细胞周期蛋白D1抑制肾小管上皮细胞增殖(1)
[摘要] 目的 观察miR-20a-5p对肾小管上皮细胞增殖的影响,并验证其对细胞周期蛋白D1(cyclin D1)的靶向调控作用。 方法 使用LipofectamineTM2000脂质体将微小RNA(miRNA)转染入人肾小管上皮细胞HK-2,实验分为3组,miR-20a-5p组转染miR-20a-5p,对照组转染阴性对照miRNA,空白组未做任何转染。CCK-8实验检测转染后各组细胞的吸光度值,流式细胞术检测各组的细胞周期变化。Western blot检测各组细胞cyclin D1的蛋白表达情况。构建荧光素酶报告基因,内含cyclin D1的3’端非翻译区(3’UTR),双荧光素酶报告基因实验验证miR-20a-5p对3’UTR的直接结合作用。 结果 MiR-20a-5p组在转染后48~120 h的吸光度值均低于对照组和空白组(P<0.05) ......
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