1 材料与方法

    1.1 鼻咽癌原代细胞培养

    新鲜鼻咽鳞状细胞癌组织由本院耳鼻喉科提供。本研究经患者知情同意和医院伦理委员会审查通过，研究工作从2015年8月开展至今。步骤：①适量新鲜标本置于15 mL离心管中，装2 mL含10℅FBS(Gibco公司)的RPMI-1640(Gibco公司)培养基。②去除外周坏死组织，无血清培养基充分漂洗3次。③将组织块剪成0.5 mm大小，加入适量0.25℅胰酶，37℃消化8～10 min；含10℅FBS的培养基终止消化，吹打均匀后200目筛网过滤；将滤液接种于25 cm2培养瓶中，培养基3 mL，置于37℃、5%CO2、湿润空气的密闭式培养箱中培养。④96孔板单细胞克隆分离提纯细胞。

    1.2 Aldefluor测定和FACS分选

    Aldefluor测定试剂盒(StemCell公司)检测细胞活性；将细胞用胰蛋白酶消化制成单细胞悬液，不含Ca2+/Mg2+的PBS洗涤，重悬浮于含5 μL ALDH 底物的1 mL Aldefluor缓冲液中(1×106个细胞/mL)，暗室37℃孵育30～40 min ......