[摘要] 目的 建立可同时检测四种疟原虫的多重荧光定量PCR方法。 方法 PCR扩增四种疟原虫目的片段，克隆并构建标准质粒，进行梯度稀释。体系按浓度加入五重引物探针，对临床四种疟原虫阳性血样及单一腺病毒和肺炎支原体阳性血样、人基因组进行特异性检测。将本地区优势虫种恶性疟及间日疟阳性血样混合并检测。每个反应做一式三份验证重复性。检测标准品梯度浓度，获得体系最低检测限。 结果 成功构建四种疟原虫标准质粒。对20份样本进行检测，其中15份恶性疟，3份间日疟，1份三日疟，1份卵形疟，与原有确证结果一致。对单一腺病毒及肺炎支原体阳性血样、人基因组检测结果均为阴性。恶性疟及间日疟阳性血样混合检测显示3条特异性扩增曲线。三个复孔的变异系数在0.17～4.96之间 ......