LDH法测定纤维蛋白胶对人脂肪干细胞的细胞毒性(2)
1.4 LDH检测试剂盒测定各组培养液中LDH的含量细胞毒性检测分为以下四组:阴性对照组、50%纤维蛋白胶浸提液组、100%纤维蛋白胶浸提液组、阳性对照组(最大酶活性释放对照)。将传至第3代的ASCs胰酶消化后调整细胞浓度为1×107/L的细胞悬液,每孔100 μL接種至96孔板中,培养24 h细胞贴壁后吸弃培养液,按上述分组分别加入以下四种培养液:DMEM培养基(阴性对照组)、50%纤维蛋白胶浸提液、100%纤维蛋白胶浸提液、含6.4%的苯酚的DMEM培养基(阳性对照组)。每组设置复孔5个,共种板2板。然后置于37℃孵箱中培养。分别在孵育24 h、72 h后取出一块96孔板,吸取各孔培养液,1000 r/min离心5 min去除沉淀。使用LDH检测试剂盒按照说明书检测各组培养液中LDH的含量。
1.5 统计学方法
数据采用SPSS17.0统计学软件进行分析处理。计量资料以均数±标准差表示,组间比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用SNK-q检验。P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 人脂肪干细胞形态学观察
从人脂肪抽吸物中经酶消化法提取原代ASCs ......
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