胞核内高表达M—CSF对HeLa细胞生长增殖的影响(2)
1.2.2 分组方法 顺铂治疗情况下的三种细胞为实验组,紫杉醇不同浓度情况下的三种细胞变化情况为对照组。1.2.3 MTT检测方法 首先,需要配制溶液,将0.5 g的MTT溶于磷酸缓冲液培养基中,容量为100 mL,细菌的去除使用0.22 μm滤膜过滤,置4℃环境下避光保存,配制和保存时都需要使用铝箔纸来避光。其次,检测细胞成长方法,对完全培养基的细胞浓度进行调整,浓度为5×103个/mL,每孔接入96孔培养板,再分别加入顺铂和紫杉醇,每组3孔,持續48 h。再加入100 μL/孔的DMSO,振摇均匀之后使用EXL-800型酶标仪测定。
1.2.4 Western blot测定方法 在细胞生长到90%左右时,需要使用冰预冷的PBS清洗2次。1000 rpm,时间为5 min,去除上清,再加入细胞裂解液,剂量为70 μL,沉淀,置冰上30 min,在4℃的环境下进行离心,10 min后收集上清。最后加入蛋白上样缓冲液,在100℃的环境下煮沸,时间持续5 min,在-20℃温度中保存。
1.3 统计学方法
本次研究所选用的统计学软件为SPSS 19.7,对研究中涉及的数据进行分析。计量资料用均数±标准差(x±s)表示,采用t检验;计数资料用%表示,采用χ2检验,以P<0.05为差异有统计学意义 ......
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