1 材料与方法

    1.1样本来源

    MDCK细胞株B/浙江南湖/1310/2014(乙型Yamagata系)培养液，为本实验室留存，起血凝滴度为1∶128。毒株培养液经磷酸盐缓冲液(PBS)10倍倍比稀释，获得不同浓度的流感病毒培养液。选取其中10倍、104倍、107倍稀释后的培养液分别作为高浓度、中浓度、低浓度样本，分装后于-80 ℃冻存。

    1.2核酸提取

    将上述高、中、低三个不同浓度的流感病毒上清液，按核酸提取试剂盒(ambion MagMAX-96 Viral RNA)说明书，在KingFisher Flex system核酸提取仪(Thermo Fisher Scientific Inc.，USA)上提取流感病毒RNA。提取的核酸经检测后-80℃保存。

    1.3方法

    1.3.1 荧光PCR扩增 本次实验扩增所需的引物、探针均由浙江省疾病预防控制中心病毒所提供。(1)常规RT-PCR反应液配置和PCR扩增条件参照TaKara 公司 One Step PrimeScript RT-PCR Kit 试剂盒 ......