1.4.3 RNA的检测 把逆转录所得的1000 ng/μL的cDNA1 μL加入100 μL的Ep管中，再加入SYBR Green试剂盒中的DNA转录酶(2×Taq酶Mix)10 μL及超纯水12.8 μL，再加入上海生工生物工程股份有限公司合成的Trα-2β和人β-actin引物，进行PCR试验(表1)。所有EP管中的试剂均在PCR仪中反应，95℃反应5 min，95℃反应30s，61℃反应30 s，72℃反应1 min，72℃再反应5 min，再返回步骤2，步骤2～5再循环34次后12℃保存(表2)。

    1.5结果阅读

    使用凝胶成像分析系统紫外透射分析扫描各条带的光密度，以Trα-2β的光密度值与β-actin基因的光密度值之比为相互间进行比较的参数。以癌旁正常组织参数的平均值为标准，未出现条带为基因缺失。用去离子水做为阴性对照。使用Quantity-One软件，计算各个样本Trα-2β的转录水平，各个组织中Trα-2β的相对值=目的扩增条带的灰度值/β-actin基因扩增条带的灰度值。

    1.6统计学方法

    实验数据采用SPSS 20.0统计学软件进行统计分析 ......