XRCC1基因多态性对非小细胞肺癌患者铂类药物化疗敏感性的影响研究(2)
所有病例均在化疗前抽取2 mL外周血,置乙二胺四乙酸钠抗凝管。患者取外周血标本前均签署知情同意书,本研究方案获得福建医科大学附属第一医院医学伦理委员会批准。1.3实验方法
使用EasyPure Blood Genomic DNA(北京全式金)试剂盒提取外周血DNA,DNA 置于-20℃低温冰箱保存备用。以聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法进行XRCC1基因Arg399Gln多态位点分析[9]。引物为F:5’-TGTCTCCCCTGTCTCGT-TCC—3’;R:5’-ACTTGTTCTCCCACCCCTGA-3’,PCR反应总体积50 μL,其中含有0.1~0.2 μg模板 DNA、0.2 μmol/L各引物、0.2 mmol/L dNTP、1.25~1.50 UTaq聚合酶(北京全式金)、5 μL 10×反應缓冲液,用ddH2O2补至50 μL。PCR条件为:95℃预变性5 min,95℃ 30 s、56℃ 30 s、72℃ 30 s进行35个循环 ......
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