miR—101调控非小细胞肺癌的发病机制(2)
1 材料与方法1.1组织样本和细胞系
选取我院自2016年11月~2017年10月胸外科手术切除的11例经病理确诊为NSCLC组织标本和与之匹配的癌旁组织,所有患者均知情同意并签署知情同意书。本研究通过我院伦理委员会审查并批准,所有实验均按照相关的指南和规定完成。
NSCLC细胞株A549来源于ATCC(Manassas,VA,USA),从中国科学院生物化学与细胞生物学研究所获得。用补充10%胎牛血清、2 μM谷氨酰胺、100 IU/mL青霉素和100 μg/mL硫酸链霉素的DMEM培养液培养细胞。
1.2 RNA提取和实时定量PCR(RT-PCR)
使用TRIzol试剂(Invitrogen,Carlsbad,CA,USA)按照产品说明书提取总RNA,并于-80 °C下保存备用。检测miRNA表达时 ......
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