1.2 主要试剂及仪器

    主要试剂及仪器包括：二甲苯、中性树脂、苏木素、无水乙醇、免疫组化染色试剂盒、鼠抗人ERα单克隆抗体、鼠抗人ERβ单克隆抗体、GPER兔抗人多克隆抗体、DAB显色剂、精密pH计、光学显微镜、光学相机、石蜡切片机、烤片机、捞片机、恒温烤箱等。

    1.3 实验步骤

    二甲苯脱蜡，系列酒精逐级脱水，PBS冲洗→切片浸入柠檬酸缓冲液中，加热至98℃持续15 min后冷却，PBS冲洗→50 μL 3%H2O2，室温下15 min，PBS冲洗→50 μL封闭山羊血清工作液，37℃孵育15 min→50 μL一抗，PBS空白对照，37℃孵育2 h，PBS冲洗→50 μL羊抗兔IgG溶液，37℃孵育15 min，PBS沖洗→50 μL辣根酶标记链霉卵白素工作液，37℃孵育15 min，PBS冲洗→DAB溶液显微镜下显色→苏木素复染，酒精脱水，中性树胶封固。

    1.4 结果判定

    免疫组化结果由2名病理医师分别评分，如结果不一致则重新阅片评估。按照染色程度及高倍视野下阳性细胞数来进行评分：①细胞染色程度：所有细胞均未染色计0分，染色细胞呈弱阳性计1分 ......