1.2研究方法

    1.2.1 外周血DNA提取 抽取SCAs患者、“健康”家系成员和正常对照组外周血4 mL，采取标准酚/氯仿抽提法提取DNA作为PCR模板。

    1.2.2 PCR扩增 根据文献[6]合成引物：SCA3-F：5-CCAGTGACTACTTTGATT CG-3；SCA3-R：5-TGGCCTT TCACATGG ATGTGA A-3。25 μL反应体系：10×PCR Burffer 2.5 μL，20 mmol/L mg2+1.875 μL，dNTPs(2.5 mmol/L)2 μL，Taq酶(5U/μL)0.2 μL，Primers(0.1 μg/μL)各0.5 μL，DNA模板1 μL，ddH2O补足至25 μL。PCR 扩增：95℃预变性5 min，94℃变性40 s；不同退火温度55℃退火40 s；72℃延伸1 min；最后72℃延伸10 min；4℃保存；共30个循环。PCR产物检测：使用1.5%琼脂糖凝胶电泳，溴化乙锭染色后在自动凝胶成像系统上观察结果 ......